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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 透射电镜观察细胞样品
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jojo-z

金虫 (小有名气)

[求助] 透射电镜观察细胞样品

请问大家有没有用透射电镜观察过细胞样品呢？如何准备样品？要拍出好的照片有哪些注意事项？谢谢了~
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电镜表征 细胞实验

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1楼 2011-05-13 10:35:23
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

okfull6

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
silicare(金币+3): 谢谢分享 2011-05-20 18:10:45
我做的是微藻细胞透射电镜，用的1.5%到2.5%的戊二醛固定，放4度冰箱存放，染色切片，结构观察的非常清楚，亚显微结构一目了然
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9楼2011-05-16 15:17:54
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普通回帖

小森虫

铜虫 (小有名气)
★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-05-13 20:49:08
对于细胞样品的制备比较复杂，不知你的细胞时悬浮的还是贴壁的单层细胞？
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屎胖纸
2楼2011-05-13 20:37:48
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csxu20100608

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励下 2011-05-14 09:22:31
jojo-z(金币+1): 谢谢啊，不过我不是用组织取样啊？我用的是贴壁培养的传代细胞` 2011-05-14 10:39:03
jojo-z(金币+1): 2011-05-18 09:27:04
取样要快，组织块要小于1立方厘米，用戊二醛固定12小时。
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追求健康、快乐人生！我能！
3楼2011-05-14 08:37:39
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jojo-z

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jojo-z at 2011-05-13 10:35:23:
请问大家有没有用透射电镜观察过细胞样品呢？如何准备样品？要拍出好的照片有哪些注意事项？谢谢了~

是贴壁的单层细胞，想看细胞的内部结构~
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4楼2011-05-14 10:37:25
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jojo-z

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 小森虫 at 2011-05-13 20:37:48:
对于细胞样品的制备比较复杂，不知你的细胞时悬浮的还是贴壁的单层细胞？

是贴壁的单层细胞，想看细胞的内部结构~
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5楼2011-05-14 11:38:39
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小森虫

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

jojo-z(金币+8): 非常感谢啊 2011-05-15 19:24:33
silicare(EPI+1): 2011-05-20 18:10:53
对于单层贴壁细胞的透射电镜观察制样方法主要由三种：消化离心法、刮除离心法、原位包埋法。
    消化离心法，就是将培养的细胞用胰酶消化下来，离心成团块，再按常规的透射电镜超薄切片制作过程制样就好了，只是样品为细胞，个步骤停留时间要短些，这视具体细胞而定。
    刮除离心法，就是将培养的细胞用细胞刮子刮下，然后离心成团块，其后与消化离心法相同。
    原位包埋法，是将细胞培养在小玻璃盖玻片上，然后连同小盖玻片一起进行固定，脱水等常规操作，只是在包埋时，将装有包埋液上的胶囊倒扣于细胞样品面，当然还有其他原位包埋法，你可以查一些资料，很多的。
    消化离心法最简单易行，但是消化后细胞的形状结构等都偏离了正常的生活状态~原位包埋法可较大程度的保持细胞的贴壁生长状态，但是操作复杂。刮除离心法的效果介于两者之间。
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6楼2011-05-15 12:54:27
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jojo-z

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 小森虫 at 2011-05-15 12:54:27:
对于单层贴壁细胞的透射电镜观察制样方法主要由三种：消化离心法、刮除离心法、原位包埋法。
    消化离心法，就是将培养的细胞用胰酶消化下来，离心成团块，再按常规的透射电镜超薄切片制作过程制样就好了，只是 ...

很详细啊，谢谢了，虽然对做切片还不是很理解，但是这应该是一个固定过程是吧？只是我从制样到观察至少有好几个小时时间，这样不会有影响吗？
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7楼2011-05-15 19:29:37
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小森虫

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

jojo-z(金币+2): 谢谢了 2011-05-17 09:03:27
jojo-z(金币+3): 2011-05-18 09:27:26
引用回帖:
Originally posted by jojo-z at 2011-05-15 19:29:37:
很详细啊，谢谢了，虽然对做切片还不是很理解，但是这应该是一个固定过程是吧？只是我从制样到观察至少有好几个小时时间，这样不会有影响吗？

固定的作用就是让细胞快速停止一切活动，保持一个状态。固定剂固定后样品可以保存几天或更长时间的，多以从制样到观察间隔几小时几乎没影响的。
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8楼2011-05-16 13:23:00
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guojing0000

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jojo-z at 2011-05-13 10:35:23:
请问大家有没有用透射电镜观察过细胞样品呢？如何准备样品？要拍出好的照片有哪些注意事项？谢谢了~

楼主你好，我也需要做细胞的透射电镜样品，但是我还是不知道具体的做法，请问你有详细的资料可以发我一份学习一下吗？谢谢啦
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10楼2011-05-20 18:05:44
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