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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 土壤总DNA提取步骤中，加入异丙醇后，静置，出现分层，求助高手
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jipojiong

木虫 (小有名气)

[交流] 土壤总DNA提取步骤中，加入异丙醇后，静置，出现分层，求助高手

采用直接提取法提取土壤基因组，具体操作方法可参照http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3024619
中的步骤

问题是这样，加入0.6倍的异丙醇后，出现明显的分层现象，上层无色，下层淡黄色，请问为什么分层，接下来该如何提取？

个人感觉下层应该是氯仿，但前面的步骤中离心后吸取上清并没有把下层的氯仿吸到呀。求助高手
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1楼 2011-05-10 15:09:27
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yuruoyuxue

木虫 (正式写手)
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jipojiong(金币+1): 离心后有白色的蛋白质层，在分层的界面之间。我吸取上层至新的离心管，加入异丙醇后静置一会出现了分层。一共是八管，有四管出现了这个现象。 2011-05-10 17:15:28
分层？异丙醇加入应该是一体的，DNA在上面的，现状的。我做实验的时候最下面的是多糖与蛋白质！
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6楼2011-05-10 16:22:36
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yuruoyuxue

木虫 (正式写手)
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我想问一下，分层是像有机与无机溶剂混合的那种，还是说是上层澄清下层浑浊？
我试验中出现的后种情况。
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11楼2011-05-11 10:33:02
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yuruoyuxue

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by jipojiong at 2011-05-11 10:48:53:
有点像 上层是水层 下层是氯仿 的那种感觉， 下层黄色 稍有浑浊

我想那就在实验中宁可多弃些上层的吧。应该会对实验上有帮助！
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13楼2011-05-11 21:37:52
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