| 查看: 652 | 回复: 1 | ||
[求助]
DNA提取
|
| 我提取土壤总ＤＮＡ，样品前处理时用ＰＢＳ（ｐＨ ８．０）洗涤土壤两次，我想请教一下具体的操作步骤，比如是将土壤用ＰＢＳ悬浮以后，离心吗？那离心的转速该怎么把握呢，要达到洗涤的目的又不担心土壤细菌ＤＮＡ不损失 |
回复此楼» 猜你喜欢
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有10人回复
-
26申博（荧光探针方向，有机合成）
已经有4人回复
-
要不要辞职读博？
已经有3人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有26人回复
-
2026年机械制造与材料应用国际会议 （ICMMMA 2026）
已经有4人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有6人回复
-
Cas 72-43-5需要30g，定制合成，能接单的留言
已经有8人回复
-
北京211副教授，35岁，想重新出发，去国外做博后，怎么样？
已经有8人回复
-
自荐读博
已经有3人回复
-
不自信的我
已经有5人回复
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
1、前期样品的洗涤 取约1g的土壤样品，用30ml 0.1M灭菌PBS缓冲液悬浮（加缓冲液时可以分批次加，每次涡旋3-5min，使样品均匀浑浊）。200*g离心5min，收集上清（菌体），弃去沉淀，次步重复3次。9000*g离心5min，弃去上清，收集沉淀（菌体），将上清移至另一离心管中。收集的菌体用30mlPBS缓冲液充分悬浮，9000*g离心5min。重复洗涤3次。最后将洗涤好的菌体悬浮在5ml的PBS缓冲液中，用枪吹打振荡混匀，平均分装至5个1.5mlEp管中，负二十摄氏度保存或直接用于DNA提取 2、DNA提取 这个要看你想怎么提了。可以自己配一些试剂提（如果实验室经费有限的话），也可以直接买试剂盒提，要更方便些。 |
2楼2012-08-16 17:22:38