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SuperJerry6金虫 (小有名气)
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[求助]
sds-page电泳测定
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询问下基本的操作步骤细节 [ Last edited by lovibond on 2011-6-29 at 08:25 ] |
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2楼2011-05-07 22:04:15
【答案】应助回帖
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小损样儿(金币+1, 食品EPI+1): 感谢专家泡泡耐心细致的解答，欢迎多多帮助那些在科研中迷惑的孩子…… 2011-05-07 22:22:09
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 09:48:34
小损样儿(金币+1, 食品EPI+1): 感谢专家泡泡耐心细致的解答，欢迎多多帮助那些在科研中迷惑的孩子…… 2011-05-07 22:22:09
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 09:48:34
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SDS-PAGE电泳 SDS-PAGE电泳：电泳的制备和电泳条件参照汪家政[5]等的方法，分离胶浓度为12%（29.2：0.8的Acr:Bis, 375mMTrisbase, 0.1%SDS，pH=8.8），浓缩胶浓度为5%（29.2:0.8的Acr：Bis，125mMTrisbase，0.1% SDS，pH=6.8），样品缓冲溶液（60mM Trisbase, pH=6.8，25%的甘油，14.4mol/L MCE, 2%SDS, 0.1%wt/vol的溴酚蓝）与样品混合比例为5:1，电泳缓冲溶液（25mM Trisbase, 0.05%MCE, 192mM甘氨酸, 0.1% SDS, pH=8.3），电泳条件：80V出浓缩胶后电压调到120V。电泳结束后将凝胶取下进行染色，染色剂为考马斯亮蓝R-250（考马斯亮蓝0.1%、甲醇45%、冰醋酸10%），45min后进行脱色（脱色剂：20%甲醇、7%冰醋酸）2h，凝胶成像仪成像。 |
3楼2011-05-07 22:07:53
4楼2011-06-04 13:18:43