应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家来讨论下你们如何做定量的
41/1返回列表
查看: 655  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhjzhou

木虫 (著名写手)

[交流] 大家来讨论下你们如何做定量的

我咱们这里有很多做定量的牛人，大家来讨论下如何做定量的，我先说一下自己是如何做的。
我提取RNA用TRIZOL，然后将RNA定量用Promega的反转录酶翻转。翻转后的cDNA直接稀4倍，作为模板上定量。这样跑出的内参基因的Ct值应该一样的吧？我听说有不测浓度直接翻转上定量的，这样跑出内参基因Ct相差很多，那这样的内参基因还有意义吗？内参不是看家基因，无论处理还是对照都应该不变化的啊，希望牛人来指点。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-05-05 10:26:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
zhjzhou(金币+1):谢谢参与
zhjzhou(金币+1): 2011-05-05 12:10:00
西瓜(金币+3): 赞成~ 2011-05-05 12:41:33
不是的，因为样品本身和处理时的差异导致抽提的浓度不同，还有不同批次扩增效率不同，结果当然不用会一样
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-05-05 11:07:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhjzhou

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 475502411 at 2011-05-05 11:07:09:
不是的，因为样品本身和处理时的差异导致抽提的浓度不同，还有不同批次扩增效率不同，结果当然不用会一样

那你反转录或定量上样的时候模板定量吗？
赞一下 回复此楼
3楼2011-05-05 12:10:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zhjzhou at 2011-05-05 12:10:34:
那你反转录或定量上样的时候模板定量吗？

不定量
回复此楼
4楼2011-05-05 14:15:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhjzhou 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭