应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » western抗体稀释、孵育的时间与条件的疑惑与不解
51/1返回列表
查看: 5581  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiajing_acm

新虫 (小有名气)

[求助] western抗体稀释、孵育的时间与条件的疑惑与不解

各位大侠：

        你们好！请问做western时抗体一般用什么稀释好，TBST还是封闭液啊？加入一抗后是4°C孵育过夜好呢还是室温下2h好呢？若是4°孵育过夜需要在把摇床上放到冰箱/柜里震荡过夜吗？可是冰箱/冰柜有插座可以提供摇床的电源吗？

        还有二抗呢？室温一般孵育多久呢？谢谢啦！小弟新手兼菜鸟，恳请大侠们多多指点！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-03 21:47:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nieyaru

新虫 (小有名气)
我用的抗体稀释液，这个可以重复用个3~4次，二抗用的是5%的封闭液稀释的;一抗孵育室温1h或4℃过夜，二抗一般室温孵育1h.
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2012-07-08 02:01:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

simplelcc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢！ 2011-05-05 12:40:54
xiajing_acm(金币+2): 2011-05-05 19:49:39
xiajing_acm(金币+1): 谢谢 2011-07-05 16:44:36
我一般用TBST稀释抗体，一抗冰箱孵育过夜；二抗室温2h；我是倒扣着孵，所以都不摇。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-05 12:34:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snailtt

捐助贵宾 (小有名气)
师兄确实在冰箱摇过夜的，还专为此买了个小摇床和两孔的劣质插座，为了线够细能关上门。我自己也是小菜鸟，还在养细胞~
赞一下 回复此楼
3楼2011-05-05 19:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenzhiren

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xiajing_acm(金币+3): 2011-05-07 20:51:39
引用回帖:
Originally posted by xiajing_acm at 2011-05-03 21:47:41:
各位大侠：

        你们好！请问做western时抗体一般用什么稀释好，TBST还是封闭液啊？加入一抗后是4°C孵育过夜好呢还是室温下2h好呢？若是4°孵育过夜需要在把摇床上放到冰箱/柜里震荡过夜吗？可是冰箱/冰柜 ...

1、一抗用缓冲液稀释即可。
2、孵育时间根据实验结果来摸索。
3、若4°过夜，条件容许的话，最好使用摇床。没有条件在冰箱里放摇床，那就直接放4°过夜好了，第二天摇床上多洗几次。摇床可以放到恒温层析柜里面。
赞一下 回复此楼
4楼2011-05-06 17:28:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302求调剂 +3 小贾同学123 2026-03-15 5/250 2026-03-16 20:39 by zhq0425
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[教师之家] 焦虑 +7 水冰月月野兔 2026-03-13 9/450 2026-03-16 10:00 by Quakerbird
[考博] 欢迎申博同学联系 +3 天道酬勤2026686 2026-03-10 7/350 2026-03-15 19:03 by 天道酬勤2026686
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123！ 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考研] 085602化工求调剂 +7 董boxing 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:07 by BruceLiu320
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭