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xiajing_acm

新虫 (小有名气)

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[求助] western抗体稀释、孵育的时间与条件的疑惑与不解

各位大侠：

你们好！请问做western时抗体一般用什么稀释好，TBST还是封闭液啊？加入一抗后是4°C孵育过夜好呢还是室温下2h好呢？若是4°孵育过夜需要在把摇床上放到冰箱/柜里震荡过夜吗？可是冰箱/冰柜有插座可以提供摇床的电源吗？

还有二抗呢？室温一般孵育多久呢？谢谢啦！小弟新手兼菜鸟，恳请大侠们多多指点！

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1楼 2011-05-03 21:47:41

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wenzhiren

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

xiajing_acm(金币+3): 2011-05-07 20:51:39

引用回帖:

Originally posted by xiajing_acm at 2011-05-03 21:47:41:
各位大侠：

你们好！请问做western时抗体一般用什么稀释好，TBST还是封闭液啊？加入一抗后是4°C孵育过夜好呢还是室温下2h好呢？若是4°孵育过夜需要在把摇床上放到冰箱/柜里震荡过夜吗？可是冰箱/冰柜 ...

1、一抗用缓冲液稀释即可。
2、孵育时间根据实验结果来摸索。
3、若4°过夜，条件容许的话，最好使用摇床。没有条件在冰箱里放摇床，那就直接放4°过夜好了，第二天摇床上多洗几次。摇床可以放到恒温层析柜里面。