| 查看: 667 | 回复: 1 | ||
zhaoqingcaas新虫 (小有名气)
|
[求助]
SDS-PAGE电泳中，蛋白质分子（多肽分子）是伸展状态的吗？
|
|
我的融合蛋白由两个相同大小（27kDa）的蛋白线性连接而成，在跑电泳时会出现两条带，一条是融合蛋白，大小55kDa，另一条是裂解后的带，大小27kDa 做转印时，只有裂解后的小蛋白可以与各自的血清反应，融合蛋白不被两种血清所识别。 请问： 1 融合蛋白为什么会裂解，为什么只在连接处裂解，而不在其他任何部位裂解呢？ 2在变性条件下，融合的大蛋白与裂解了的蛋白只有分子量大小的差异，其他条件都是一样的，都是包涵体蛋白，高温变性后次级键被破坏，成为无序松散的伸展状态，如果小蛋白能够有线性表位可以被阳性血清所识别，为什么大蛋白的线性表位不能被血清所识别呢？蛋白质在变性条件以及电极作用下都是伸展状态，有没有可能融合蛋白由于分子量大，并没有完全伸展，出现随机的折叠状态，导致抗原表位没有完全暴露，所以不被血清识别？ |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂
已经有4人回复
-
311求调剂
已经有6人回复
-
0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投
已经有4人回复
-
化学工程321分求调剂
已经有6人回复
-
本人考085602 化学工程 专硕
已经有9人回复
-
材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐
已经有7人回复
-
326求调剂
已经有3人回复
-
焦虑
已经有8人回复
-
308求调剂
已经有4人回复
-
NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗
已经有14人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- SDS-PAGE 电泳蛋白分子量飘移
已经有12人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有24人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有23人回复
- SDS-PAGE电泳求助
已经有13人回复
- SDS-PAGE电泳蛋白质变性
已经有7人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳条带问题
已经有7人回复
- 【求助】急！有木有做过Tricine－SDS－PAGE小分子蛋白电泳的进！
已经有32人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE电泳图 求高人帮忙分析下问题所在 谢谢啦！
已经有19人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶浓度问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE电泳问题
已经有38人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE凝胶电泳
已经有33人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE蛋白电泳的蛋白条带回收
已经有8人回复
- 【求助/交流】急！SDS-page电泳成像
已经有9人回复
天涯萧客
金虫 (正式写手)
放羊大叔
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1038.3
- 散金: 15
- 帖子: 353
- 在线: 166.2小时
- 虫号: 756987
- 注册: 2009-04-25
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励下~~看来楼主是个动漫控，头像柯南，昵称大空翼~~~ 2011-05-03 23:01:15
zhaoqingcaas(金币+20): 这两个小片段只是大小一样，linker是一个小的具有酶活性的蛋白，可以自我催化下游蛋白解离，所以会裂解。这个不是我构建的，我也刚刚问明白，呵呵，非常感谢你的回答。小蛋白被识别是因为在转印到膜上以后，变性条件去除，部分空间构象恢复。而融合蛋白因为一级结构改变而无法形成正确的高级结构，所以不被血清所识别。我也是刚刚弄明白，不过还是非常感谢你的回答，欢迎讨论 2011-05-03 23:35:02
lstt09nk(金币+3): 鼓励下~~看来楼主是个动漫控，头像柯南，昵称大空翼~~~ 2011-05-03 23:01:15
zhaoqingcaas(金币+20): 这两个小片段只是大小一样，linker是一个小的具有酶活性的蛋白，可以自我催化下游蛋白解离，所以会裂解。这个不是我构建的，我也刚刚问明白，呵呵，非常感谢你的回答。小蛋白被识别是因为在转印到膜上以后，变性条件去除，部分空间构象恢复。而融合蛋白因为一级结构改变而无法形成正确的高级结构，所以不被血清所识别。我也是刚刚弄明白，不过还是非常感谢你的回答，欢迎讨论 2011-05-03 23:35:02
| 你的血清是怎么得来的，是用线性蛋白（变性蛋白）打兔子的来的吗。建议可以先用考染看看，到底是你的蛋白是都是27的还是还有55的。在确定是不是血清问题。还有请问这两个小片段是完全一样的还是只是大小一样， |
2楼2011-05-03 21:52:02
