应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于PFGE的问题
101/1返回列表
查看: 2475  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huangqihong

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于PFGE的问题

请教各位大虾，如附件，我跑了2次原核生物全基因组的PFGE，这菌株在基因组外还有游离的质粒。第一次似乎DNA都没有跑出胶块（后面4个泳道是经过SalI酶切的基因组），当时怀疑用的细胞太多，第二次用的细胞量减少了，但是为什么还是没有跑出东西？求解
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

王营wy

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-28 22:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)
胶浓度？ 电压？电泳时间？ 啥的 详细说说先～
赞一下 回复此楼
2楼2011-04-29 18:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangqihong

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gaoyang636 at 2011-04-29 18:27:00:
胶浓度？ 电压？电泳时间？ 啥的 详细说说先～

电泳条件：5-50s, 6V/cm, 20h, 14°。胶浓度：1%。
这些都是参照文献里面的条件，他们做的菌和我做的同一个属，应该差别不大。但就是不知道怎么回事
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-29 22:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王营wy

新虫 (初入文坛)
你好，楼主，我跑的乳杆菌的PFGE，用酶XbaI处理，电泳后跟你的图相似，点样孔很亮，泳道没有条带，不知道你的问题是怎么解决的？期盼回复~~
赞一下 回复此楼
阳光总在风雨后
4楼2011-11-03 13:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangqihong

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王营wy at 2011-11-03 13:13:11:
你好，楼主，我跑的乳杆菌的PFGE，用酶XbaI处理，电泳后跟你的图相似，点样孔很亮，泳道没有条带，不知道你的问题是怎么解决的？期盼回复~~

把plug在酶切之前用酶切缓冲液洗三次，然后再酶切，可能直接酶切体系不合适。但是仍然有很多存在于点样孔。
赞一下 回复此楼
5楼2011-11-04 02:54:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王营wy

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
谢谢，我做的时候用酶切缓冲液只洗了一次，下次我多洗两次。您做PFGE时对于条件优化这方面有什么经验，可以分享一下吗?
赞一下 回复此楼
阳光总在风雨后
6楼2012-01-04 09:26:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

带刀猎人

新虫 (小有名气)
请检查菌体是否裂解，就是在CLB里的Proteinase K是否将菌体裂解了
赞一下 回复此楼
7楼2012-04-13 14:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仁坤2013

新虫 (小有名气)
最后解决了吗
回复此楼
8楼2013-12-30 20:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangqihong

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 刘仁坤2013 at 2013-12-30 20:20:15
最后解决了吗

算是部分解决吧，样品部分跑进胶里面，但是还有很多在plug里。
赞一下 回复此楼
9楼2013-12-31 08:29:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

201130212017

银虫 (小有名气)
真的是酶切的问题么？
我跑的PFGE也是只有点样孔亮，无条带
点样孔亮的也只是marker未做酶切啊
赞一下 回复此楼
每天都高兴，幸福
10楼2014-05-07 13:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huangqihong 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 307求调剂 +9 冷笙123 2026-03-17 9/450 2026-03-19 22:44 by 学员8dgXkO
[考研] 化学求调剂 +3 临泽境llllll 2026-03-17 4/200 2026-03-19 13:59 by houyaoxu
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +3 Ncdx123456 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:18 by houyaoxu
[考研] 281求调剂（0805） +9 烟汐忆海 2026-03-16 19/950 2026-03-19 11:42 by laoshidan
[考研] 一志愿天大材料与化工（085600）总分338 +5 蔡大美女 2026-03-13 5/250 2026-03-19 10:44 by 是小刘呀～
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨； 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭