应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于PFGE的问题
101/1返回列表
查看: 2474  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

huangqihong

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于PFGE的问题

请教各位大虾，如附件，我跑了2次原核生物全基因组的PFGE，这菌株在基因组外还有游离的质粒。第一次似乎DNA都没有跑出胶块（后面4个泳道是经过SalI酶切的基因组），当时怀疑用的细胞太多，第二次用的细胞量减少了，但是为什么还是没有跑出东西？求解
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

王营wy

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-28 22:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)
胶浓度？ 电压？电泳时间？ 啥的 详细说说先～
赞一下 回复此楼
2楼2011-04-29 18:27:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangqihong

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gaoyang636 at 2011-04-29 18:27:00:
胶浓度？ 电压？电泳时间？ 啥的 详细说说先～

电泳条件：5-50s, 6V/cm, 20h, 14°。胶浓度：1%。
这些都是参照文献里面的条件，他们做的菌和我做的同一个属，应该差别不大。但就是不知道怎么回事
赞一下 回复此楼
3楼2011-04-29 22:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王营wy

新虫 (初入文坛)
你好，楼主，我跑的乳杆菌的PFGE，用酶XbaI处理，电泳后跟你的图相似，点样孔很亮，泳道没有条带，不知道你的问题是怎么解决的？期盼回复~~
赞一下 回复此楼
阳光总在风雨后
4楼2011-11-03 13:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangqihong

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王营wy at 2011-11-03 13:13:11:
你好，楼主，我跑的乳杆菌的PFGE，用酶XbaI处理，电泳后跟你的图相似，点样孔很亮，泳道没有条带，不知道你的问题是怎么解决的？期盼回复~~

把plug在酶切之前用酶切缓冲液洗三次，然后再酶切，可能直接酶切体系不合适。但是仍然有很多存在于点样孔。
赞一下 回复此楼
5楼2011-11-04 02:54:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王营wy

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
谢谢，我做的时候用酶切缓冲液只洗了一次，下次我多洗两次。您做PFGE时对于条件优化这方面有什么经验，可以分享一下吗?
赞一下 回复此楼
阳光总在风雨后
6楼2012-01-04 09:26:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

带刀猎人

新虫 (小有名气)
请检查菌体是否裂解，就是在CLB里的Proteinase K是否将菌体裂解了
赞一下 回复此楼
7楼2012-04-13 14:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仁坤2013

新虫 (小有名气)
最后解决了吗
回复此楼
8楼2013-12-30 20:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangqihong

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 刘仁坤2013 at 2013-12-30 20:20:15
最后解决了吗

算是部分解决吧，样品部分跑进胶里面，但是还有很多在plug里。
赞一下 回复此楼
9楼2013-12-31 08:29:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

201130212017

银虫 (小有名气)
真的是酶切的问题么？
我跑的PFGE也是只有点样孔亮，无条带
点样孔亮的也只是marker未做酶切啊
赞一下 回复此楼
每天都高兴，幸福
10楼2014-05-07 13:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 huangqihong 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 暗涌afhb 2026-03-16 3/150 2026-03-20 00:28 by 河南大学校友
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +6 墨墨漠 2026-03-18 6/300 2026-03-20 00:02 by 23Postgrad
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +12 曦熙兮 2026-03-15 12/600 2026-03-19 19:42 by maocaozhuxi
[考研] 271材料工程求调剂 +6 .6lL 2026-03-18 6/300 2026-03-19 15:41 by haoshis
[考研] 287求调剂 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-19 12:32 by peike
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[基金申请] 被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗？ 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭