| 查看: 823 | 回复: 1 | ||
[求助]
请教各位做植物转基因的虫子-关于PCR引物设计
|
| 请教各位植物转基因的高手高手高高手：小弟我找同学要了转pCAMBIA1301 质粒(空质粒) 的拟南芥转基因系。需要PCR扩增35S 启动子，GUS 两个外显子，一个内含子，还有NOS polyA 终止子部分；即从35S启动子到NOS polyA 终止子 片段部分；全长一共2852bp, 打算一共分两段扩增，第一段始于LacZ 的alpha 片段部分，终于GUS第二个外显子的编码区域，共1618bp；第二段始于GUS第二个外显子的编码区域，终于NOS PolyA 和右边界之间的区域 （应该也算内含子吧），全长1649bp, 使用这两对引物直接扩增pCAMBIA 1301 质粒，效果非常好 （PCR 扩增片段长度和测序结果都很好），但使用这两对引物扩增pCAMBIA1301 质粒(空质粒) 的拟南芥转基因系，能扩增出片段，但长度不对，第一对引物扩增出的片段长度为 2000bp左右，而第二对扩增出的片段长度为1000bp左右，测序结果显示，根本不是我想要的序列，请问这是什么原因？是不是我设计引物有哪个地方不对的？我应该怎么做？？多谢多谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
什么时候开奖？
已经有4人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有27人回复
-
为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？
已经有3人回复
-
2027广东省杰青
已经有9人回复
-
朋友圈看到的
已经有5人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有110人回复
-
明天放榜？
已经有5人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有11人回复
-
重要消息，中午系统在维护
已经有10人回复
-
投稿咨询
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR引物设计的问题
已经有8人回复
- 做RT-PCR时该用哪段氨基酸序列设计引物
已经有6人回复
- 如何设计重叠延伸PCR引物
已经有14人回复
- PCR, southern 转基因植物阳性检测
已经有4人回复
- 求ABI 引物设计软件使用技巧视频以及实时PCR讲座视频
已经有1人回复
- 【求助/交流】pCR引物设计的详细规则
已经有7人回复
- 【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
- 【求助/交流】关于RT-PCR引物设计
已经有9人回复
- 【求助/交流】Real time RT-PCR 引物设计问题（高悬赏请高手帮忙）
已经有28人回复
2楼2011-05-30 19:09:02
