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【求助】分子筛柱效测定
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| 分子筛柱效测定一般选择1%丙酮上样（体积为1%柱床体积），上样量大了或者小了有什么影响呢？ |
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冼亮淀粉酶
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lstt09nk(EPI+1): 有理有据 2011-04-16 21:46:21
xinshi(金币+4): 2011-04-18 18:13:51
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xinshi(金币+4): 2011-04-18 18:13:51
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这是GE公司SuperdexTM 75说明书的部分介绍，我把说明书作为附件传上来 Column performance control Check the performance of the column using the following procedure: Sample: 100 μl 0.5% acetone (5mg/ml) Eluent: buffer solution or distilled H2O Flow rate: 0.75 ml/min, room temperature Detection: 280 nm Column efficiency, expressed as the number of theoretical plates per meter, N/m, is calculated using the following equation: N/m = 5.54 × (vr / w½  平方 × (1000/L)where N/m = number of theoretical plates/meter vr = peak elution distance (m) w½ = peak width at half peak height (m) L = bed height (m) 上述层析柱长0.24m。 假如上样量体积大，则峰宽与半峰宽更接近，比值更接近1，则理论塔板数/m更小，柱效低。另外，楼主所用的体积如果依据这个说明书来看就太大了。PS：用丙酮测柱效而不是用蛋白质，二楼说的是分离蛋白质时上样量的问题。 [ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-16 at 19:57 ] |
3楼2011-04-16 15:20:54
冼亮淀粉酶
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