| 查看: 2208 | 回复: 2 | |||
[交流]
【求助】关于乙醇沉淀蛋白问题，请各位帮忙
|
|
最近想用乙醇沉淀蛋白，看到文献上写加预冷的无水乙醇至乙醇浓度为70%（v/v）,如果我有100ml蛋白粗提液，该加入多少乙醇才能使乙醇浓度达到70%？请各位帮忙解答，谢谢 附：文献原文 The supernatant (300 mL) obtained was then fractionated with iced ethanol by adapted methodology of Cortez and Pessoa (1999). The ethanol concentration values employed in the precipitation experiments were 0–30% (Fraction F1) and 30–70% (Fraction F2). For each fraction, the ethanol was slowly added to the extract under agitation (200 rpm) at 4 °C with a burette in a cold chamber. After the addition of ethanol, the agitation was stopped for 2 h and the mixture was centrifuged at 10,000g for 15 min at 4 °C. The pellets (Fraction F1 and F2) were dissolved in 75 mL 0.1 M Tris–HCl buffer (pH 8.0) at 25 °C and dialyzed against 4 L of 0.05 M Tris–HCl buffer (pH 8.0) for 2 h. |
回复此楼» 猜你喜欢
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有26人回复
-
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有8人回复
-
最失望的一年
已经有7人回复
-
推荐一本书
已经有16人回复
-
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？
已经有20人回复
-
26申博
已经有3人回复
-
请教限项目规定
已经有3人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有10人回复
-
基金申报
已经有6人回复
-
疑惑？
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助硫酸铵沉淀蛋白质的问题
已经有12人回复
- 血浆蛋白沉淀问题
已经有10人回复
- 关于糖原、乙酸钠、乙醇沉淀核酸的问题
已经有5人回复
- 为什么水提取的多糖，脱蛋白脱干净后，最终乙醇80%浓度沉淀不下来，为什么？
已经有9人回复
- 【求助】蛋白酶解液沉淀无法分离的问题
已经有23人回复
- 【求助/交流】关于Q柱分离蛋白的问题~高手帮帮忙~
已经有7人回复
- 【交流】多糖沉淀后，用95%乙醇和无水乙醇洗涤的目的什么？
已经有44人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
辽宁材料实验室高热通量框架复合材料方向招聘科研骨干2名（长期有效）
+5/235
-
中国科协青年托举（针对32岁青年人才的）是不是不搞了，25年都没有通知
+1/95
-
南昌大学化学化工学院付拯江教授拟招收“申请-考核”制博士研究生
+1/83
-
扬州大学王赪胤教授课题组 2026级博硕士研究生生招生（电化学储能 / 光催化方向）
+1/77
-
招聘：中国科学院山西煤炭化学研究所
+1/74
-
成会明院士团队｜钱希堂（国家青年人才）招博后啦！二维材料和固态电池
+1/73
-
哈尔滨工业大学王东博课题组/中科院上海微系统所梁丽娟课题组招收2026年博士生1名
+1/70
-
坐标广州，诚征男友，大个子女生，非诚勿扰
+2/44
-
211双一流北京工业大学招计算机、AI、自动控制、电子信息等方向博士生（长期有效）
+1/40
-
国重点实验室双一流A类长江学者团队招2026年全日制博士1-2名
+2/40
-
华中农大生物催化组招26年博士：代谢工程、酵母工程、药学、有机、酶工程、计算模拟
+1/30
-
专科起点双非硕士，申博求建议
+1/25
-
93年坐标北京，征女友
+1/23
-
26博士申请-药物化学方向
+2/22
-
哈尔滨工业大学（深圳）-包斌招收2026年博士研究生及博士后
+1/15
-
墨子实验室理论模拟研究组诚聘海内外优秀人才
+1/10
-
南京邮电大学-材料院尹超教授课题组-诚聘材料、化学、生物医学博士后（长期有效）
+1/8
-
香港理工大学 航空服务研究中心asrc 博士后招聘
+1/6
-
【博士后/科研助理招聘-北京理工大学-集成电路与电子学院-国家杰青团队】
+1/2
-
福建师范大学国家级人才团队招收2026年博士研究生2名
+1/2
2楼2011-04-14 07:45:35
★
reasonspare(金币+1): 积极交流奖 2011-04-14 11:36:15
mexes(金币+5): 2011-04-28 01:15:00
reasonspare(金币+1): 积极交流奖 2011-04-14 11:36:15
mexes(金币+5): 2011-04-28 01:15:00
|
没做过 百度到的 蛋白质含量，离子强度，溶液pH值，乙醇浓度，溶液温度。 1。蛋白质含量，愈高，共沉多；反之，分离愈彻底。当然有度。溶液太稀了，成本高。 2。离子强度：这与介电强度有关。 3。溶液pH值：调到目标蛋白等电点周围。 4。乙醇浓度：一般来说乙醇浓度多少，与目标蛋白的分子量有关：比如8%，可沉淀纤维蛋白原，20%可沉淀球蛋白，40%可沉淀白蛋白等等，当然，乙醇浓度与溶液pH值配合使用。加入乙醇不能过快，防止局部过浓。要边加边摇动。 否则，共沉多！或者局部变性。 5。溶液温度：必须低温，乙醇反应是个放热反应，如果温度高，可引起蛋白质变性，不可逆的变形。 这五变参数，要综合，动态的调整，可达到精确分离蛋白质的作用。 |
3楼2011-04-14 08:01:39