| 查看: 2339 | 回复: 2 | |||
[交流]
【求助】关于乙醇沉淀蛋白问题，请各位帮忙
|
|
最近想用乙醇沉淀蛋白，看到文献上写加预冷的无水乙醇至乙醇浓度为70%（v/v）,如果我有100ml蛋白粗提液，该加入多少乙醇才能使乙醇浓度达到70%？请各位帮忙解答，谢谢 附：文献原文 The supernatant (300 mL) obtained was then fractionated with iced ethanol by adapted methodology of Cortez and Pessoa (1999). The ethanol concentration values employed in the precipitation experiments were 0–30% (Fraction F1) and 30–70% (Fraction F2). For each fraction, the ethanol was slowly added to the extract under agitation (200 rpm) at 4 °C with a burette in a cold chamber. After the addition of ethanol, the agitation was stopped for 2 h and the mixture was centrifuged at 10,000g for 15 min at 4 °C. The pellets (Fraction F1 and F2) were dissolved in 75 mL 0.1 M Tris–HCl buffer (pH 8.0) at 25 °C and dialyzed against 4 L of 0.05 M Tris–HCl buffer (pH 8.0) for 2 h. |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有12人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有13人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有10人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有8人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有18人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有15人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助硫酸铵沉淀蛋白质的问题
已经有12人回复
- 血浆蛋白沉淀问题
已经有10人回复
- 关于糖原、乙酸钠、乙醇沉淀核酸的问题
已经有5人回复
- 为什么水提取的多糖，脱蛋白脱干净后，最终乙醇80%浓度沉淀不下来，为什么？
已经有9人回复
- 【求助】蛋白酶解液沉淀无法分离的问题
已经有23人回复
- 【求助/交流】关于Q柱分离蛋白的问题~高手帮帮忙~
已经有7人回复
- 【交流】多糖沉淀后，用95%乙醇和无水乙醇洗涤的目的什么？
已经有44人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
东北大学应用经济学博士招生-2027级
+1/982
-
27博士申请
+1/181
-
大连理工大学化工学院郑跃楠副教授计划招收2027级博士研究生
+1/176
-
科研涂膜制样 HK‑5000AZ 真空型实验室小型涂布试验机｜线棒 / 刮刀双模式
+1/94
-
招收2027级 博士生（湘潭大学 非均相催化 相关方向）
+1/90
-
慢蹲一个与子偕老的爱人
+1/36
-
哈尔滨工程大学 · 先进核动力装置课题组 · 2027年博士招生
+1/21
-
先寻求丙烯酸胶水开发合作伙伴
+1/13
-
各类型分子筛定制加工，技术方案
+1/10
-
中科院大连化物所张涛院士团队诚聘优秀博士后人才
+1/9
-
西南交通大学李义兵课题组博士及青年英才招聘
+1/7
-
福建师范大学招收2027年博士研究生（申请考核）
+1/6
-
中科院大连化物所张涛院士团队诚聘优秀博士后人才
+1/6
-
欢迎报考香港城市大学化学系博士课程 (HKPFS/常规PhD)
+1/5
-
仁荷大学机械工程系硕士、博士及硕博连读项目新生招生（2027年春季学期）
+1/5
-
中科院东莞材料所新能源材料研究部招聘研究员/副研究员（中央事业编制）
+1/4
-
中科院东莞材料所新能源材料研究部招聘研究员/副研究员（中央事业编制）
+1/4
-
吉林大学闫旭教授（国家级青年人才）招收2027级博士研究生
+1/4
-
您感兴趣的遗传病是哪些？您认为产前诊断在阻断遗传病传递作用有多大？
+1/4
-
树突状细胞分泌因子：抗原呈递之外的免疫调控枢纽
+1/2
2楼2011-04-14 07:45:35
★
reasonspare(金币+1): 积极交流奖 2011-04-14 11:36:15
mexes(金币+5): 2011-04-28 01:15:00
reasonspare(金币+1): 积极交流奖 2011-04-14 11:36:15
mexes(金币+5): 2011-04-28 01:15:00
|
没做过 百度到的 蛋白质含量，离子强度，溶液pH值，乙醇浓度，溶液温度。 1。蛋白质含量，愈高，共沉多；反之，分离愈彻底。当然有度。溶液太稀了，成本高。 2。离子强度：这与介电强度有关。 3。溶液pH值：调到目标蛋白等电点周围。 4。乙醇浓度：一般来说乙醇浓度多少，与目标蛋白的分子量有关：比如8%，可沉淀纤维蛋白原，20%可沉淀球蛋白，40%可沉淀白蛋白等等，当然，乙醇浓度与溶液pH值配合使用。加入乙醇不能过快，防止局部过浓。要边加边摇动。 否则，共沉多！或者局部变性。 5。溶液温度：必须低温，乙醇反应是个放热反应，如果温度高，可引起蛋白质变性，不可逆的变形。 这五变参数，要综合，动态的调整，可达到精确分离蛋白质的作用。 |
3楼2011-04-14 08:01:39
