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【求助/交流】连接实验假阳性加多如何解决
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yuyan225
金虫
(小有名气)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 1661.5
帖子: 109
在线: 156.1小时
虫号: 536336
[交流]
【求助/交流】连接实验假阳性加多如何解决
如题,我在连表达载体的时候载体与片段的摩尔比用了1:8,能长出好多菌落,但在进行菌落PCR的时候全部都是假阳性,我已经P了40多个菌落都是假阳性~~~忘各位虫友不吝赐教,谢谢!!
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1楼
2011-04-10 16:02:21
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maym3
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 0.5
帖子: 1
在线: 43分钟
虫号: 2311810
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
561030楼
:
Originally posted by
三磷酸腺苷
at 2011-04-11 08:59:02
载体酶切不完全,去磷酸化是无法解决的…………
酶切不完全的意思是,根本没切开,或者双切只切了其中一段
其实最好的解决方案是,买好一点的内切酶(NEB、Fermentas),切够时间(按照酶活定义计算,再延长一些) ...
求助32a载体自连接,怎么避免
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21楼
2013-03-02 13:28:23
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