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【求助/交流】有没有人用Luminex 200 测过mRNA的表达量?
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【求助/交流】有没有人用Luminex 200 测过mRNA的表达量?
求用Luminex 200 测mRNA表达量的技术资料,要尽可能详细的操作步骤,不是产品说明书
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2011-04-06 09:50:34
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Originally posted by
amilie030312
at 2011-04-06 12:53:59:
1、分不同的组织加入不同的裂解液(不需要抽提RNA)
2、加入杂交探针过夜杂交(同一样本多个基因检测的探针在一起)
3、洗涤未杂交上的多余探针,放入信号放大探针杂交,洗涤,加入标记探针杂交,洗涤,加入荧光 ...
最后一步给出倍比关系,应该是有个参照的吧,就是文献中说的内标。不知道这个内标是如何选取的呢,用的是什么组织中的RNA呢?还有这个内标的浓度是如何控制的,需不需要做标准曲线之类的呢?
再就是做内标用的RNA与待测的RNA是放在同一个孔中检测,还是不同的孔中检测?
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3楼
2011-04-06 13:39:31
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Originally posted by
amilie030312
at 2011-04-06 12:53:59:
1、分不同的组织加入不同的裂解液(不需要抽提RNA)
2、加入杂交探针过夜杂交(同一样本多个基因检测的探针在一起)
3、洗涤未杂交上的多余探针,放入信号放大探针杂交,洗涤,加入标记探针杂交,洗涤,加入荧光 ...
我想再问个问题,取组织样本的时候怎样才能保证取到得样本量是一致的呢?那么多的组织样本中本身含的待测RNA量应该有很大的区别吧,这样的话,测出来的数值还有可比性吗?
我现在准备学习用LUMINEX 测mRNA的实验技术,很多地方都不懂,还要多多请教你
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5楼
2011-04-12 10:51:25
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西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-15 23:31:36
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gasolineoo
at 2011-07-15 09:33:23:
您好,
看到你们谈论lunimex200,我想请问一下该仪器可不可以测自己合成的微球,荧光染料可能与试剂盒不一样。
期待您的回复,谢谢
不知道你们是用什么荧光编码的,理论上荧光的激发和吸收波长在仪器的范围内,都是可以测的。具体你应该咨询 一下Luminex公司或代理Luminex公司(如密理博)的技术支持人员。
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gasolineoo
8楼
2011-07-15 12:47:06
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