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友谊无限

金虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】药代中关于血浆处理的问题？

大家好！我正在做一个缓释片剂的药代动力学实验，因为药物吸收差，所以血药浓度很低，我看了几篇类似的文献，测出的血药浓度只能在ng/ml的级别，所以不知道怎么处理血浆才会更好一些！有两个问题请教大家：

1.我用甲醇沉淀蛋白，上清液是不是应该进行浓缩呢？

2.在做提取回收率时，具体该怎么做？我看了一些文献，做法不一。

请大家给予指导，谢谢！

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1楼 2011-04-01 15:17:32

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song110

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1306604

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

方法尽量选简单的，但是前提是回收率定量限足够，否者只好液液萃取浓缩或者用又贵又复杂的固相萃取处理了，可以先看看不同沉淀剂的效果，也可以混用。
以下是我的做法：基质效应考察
精密吸取15管空白人血浆各180μL，分成三组，每组5管，除不加内标液外按“血浆样本处理”进行操作，取上清液660μL分别加入加入不同浓度****标准液（50、500、7000 ng•mL-1 ）20μL和内标液****40μL，混匀后取150μL进样，记录样品峰面积比（A1），同时，另取15只管，分成三组，每组5管，各加流动相180μL代替空白血浆，其余操作与上相同，记录样品峰面积比（A2），将峰面积比进行比较，以A1/mean A2为基质效应指标。
方法的回收率测定
精密吸取180μL空白人血浆，加入20μL含****浓度为50、500、7000 ng•mL-1的标准液制得含****浓度为5、50、700 ng•mL-1 的血浆标准品各5份。按“2-1. 生物样本的处理”项的方法处理后进样，记录样品峰面积（A2），与用含有相应量的****溶液平均A1峰面积比较，计算血浆中提取回收率。