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鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】再次请教已有6人参与

SDS法提取DNA，用异丙醇沉淀了很多白色絮状沉淀，离心后无菌水溶解4℃过夜后竟然不怎么溶解，跑电泳后没有DNA,一点也没有。那白色的东西是什么？？跑电泳有RNA带，是不是说明细胞已经破碎了？？？

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1楼 2011-03-30 15:52:17

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引用回帖:

Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-04-15 23:32:13:
你这是提取真菌总DNA？把你的实验步骤和真菌DNA提取缓冲液配方发上来看看。

提取缓冲液：100mmol/L的Tris-Hcl,PH=8,40mmol/L EDTA,2%de SDS
我是从青霉菌里提的，开始用的SDS法，液氮研磨+500ul抽提缓冲液65℃水浴1h后，12000离心10min，加两次氯仿：异戊醇（24：1）后离心10Min,12000收集上清，加等体积异丙醇-20放置30min以上，13500离心，用75%乙醇洗无菌风吹干后加无菌水溶的，结果跑电泳只有RNA。然后做了好多次都这样