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鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

1949stone: 果然问题多多啊 2011-04-21 12:59:36
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-04-20 22:39:16:
两三天过去了,楼主提取得怎样了?

我很无语啊,有一个还有一点,我就做了PCR然后送去生工克隆测序了,其他的还是没有,做了PCR也没有,做出来的我也不明白是怎么蒙出来的,现在还有两株,现在还不知道怎么办,老师说以前他们做都会做出好多DNA来,为什么我做不出来啊?送去生工做600一个,关键是老师不同意。我很惆怅,所有的后续试验我都做完了,前边卡在这,好郁闷啊!!!
31楼2011-04-21 12:43:53
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鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-04-20 23:15:15:
所以我认为苯酚应该加,除非有什么我现在还不知道的特殊要求。

我用苯酚来着啊,我想问一下,是不是我得试剂出问题了啊??像苯酚氯仿要避光啊。什么的。我自己分析,既然有RNA就说我破壁没问题,问题就在DNA释放以后是不是溶解,还有就是在纯化上面了对吗。那第一步,在水浴以后离心的速度跟温度有没有很大的影响啊??4℃不会太低吧,不过后来我把温度调到20℃。


我真的很想很想很想看看你们是怎么做的,从来没看过别人做!!!!!
32楼2011-04-21 12:53:56
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+3): good 2011-04-21 18:44:34
饱和酚是要避光的,你在想,你有没有试一下照着我的方法做一次?各个步骤都严格按照我的,我觉得可能就成功了,要不然就只能再讨论了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
33楼2011-04-21 14:35:41
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鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

★ ★
西瓜(金币+2): 很好学! 2011-04-21 17:08:53
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-04-21 14:35:41:
饱和酚是要避光的,你在想,你有没有试一下照着我的方法做一次?各个步骤都严格按照我的,我觉得可能就成功了,要不然就只能再讨论了。

好,我严格做一次!!
34楼2011-04-21 16:38:50
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+2): 很用心,说的很对! 2011-04-21 18:45:15
引用回帖:
Originally posted by 鬼笔坏坏 at 2011-04-21 16:38:50:
好,我严格做一次!!

如果成功了,麻烦回帖说明是谁的方法有帮助哦。这样既是对回帖的虫虫最好的报答,也方便后人学习。
35楼2011-04-21 17:09:07
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
有试剂盒嘛   感觉有的话应该能行
36楼2011-04-21 21:05:23
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鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by linyingjia at 2011-04-21 21:05:23:
有试剂盒嘛   感觉有的话应该能行

没有试剂盒啊!!!说实话的,我还见过真的试剂盒长么样呢!!(严肃勿笑)
37楼2011-04-21 21:26:08
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鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-04-21 17:09:07:
如果成功了,麻烦回帖说明是谁的方法有帮助哦。这样既是对回帖的虫虫最好的报答,也方便后人学习。

恩恩,会的,必须的
38楼2011-04-21 21:26:43
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+3): 鼓励新虫交流 2011-04-22 17:28:59
你可以试着改变电泳条件,我曾经也有这样的问题,把胶的浓度提高,电压降低,试试。呵呵
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
39楼2011-04-22 12:41:16
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

★ ★
西瓜(金币+2): 感谢分享经验 2011-04-22 17:29:11
另外本人觉得试剂盒提DNA方便,可是提的量比较少,电泳没控制好的话,就会没有带。
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
40楼2011-04-22 12:43:14
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