| 查看: 3946 | 回复: 52 | |||||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||||
[交流]
【求助/交流】怎么做都提不出DNA，请高手帮一下忙喽！！！！ 已有23人参与
|
|||||
|
怎么做都提不出DNA，请高手帮一下忙喽！！！！ 我是从青霉菌里提的，开始用的SDS法，液氮研磨+500ul抽提缓冲液65℃水浴1h后，12000离心10min，加两次氯仿：异戊醇（24：1）后离心10Min,12000收集上清，加等体积异丙醇-20放置30min以上，13500离心，用75%乙醇洗无菌风吹干后加无菌水溶的，结果跑电泳只有RNA。然后做了好多次都这样。又换的氯化苄法，（液氮研磨0.1g+500ul缓液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化苄，50℃，1h）做这个我连醋酸钠PH都调到5.2了，结果还是没有。就崩溃了,麻烦高手给指导一下！！！ [ Last edited by 1949stone on 2011-4-21 at 12:54 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有249人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MolEPI: 46
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 20245.5
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6622
- 在线: 2798小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+4): 考虑epi 2011-04-21 12:58:23
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+4): 考虑epi 2011-04-21 12:58:23
楼主上图，提取得到的样品的电泳图，看看有没有什么RNA和DNA，别忘了点上两个ladder，λ 线性DNA用于指示青霉DNA，1kb DNA 用于指示RNA。当然，如果有经验了，就点上这两个中的一个就可以了。附上我的一张电泳图，第一个泳道是λ 线性DNA大概四十多KB，泳道2、3、4共三个是真菌基因组DNA，可以看得到在λ 线性DNA相似大小的地方有一条亮带，那就是真菌基因组DNA；在泳道前面部分有一大堆长长的是RNA。 [ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-15 at 23:58 ] |
20楼2011-04-15 23:37:54
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 有理 2011-04-21 12:53:50
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 有理 2011-04-21 12:53:50
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2011-03-28 20:00:30
河外生命
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2413.5
- 红花: 1
- 帖子: 61
- 在线: 103.6小时
- 虫号: 671980
- 注册: 2008-12-10
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2011-03-28 21:39:19
4楼2011-03-29 09:12:05
