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daiguoying

木虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】乳腺癌细胞培养液浑浊是什么原因,怎样补救

求助各位大虾
本人平行培养了两瓶Bcab-37,其中一瓶昨天发现浑浊,显微镜下观察有近乎透明圆形细胞漂浮,昨晚用pbs洗两遍后换液,今天观察扔有浑浊
请问这是染菌了还是其他原因,该怎样补救呢
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★
daiguoying(金币+3):谢谢参与
daiguoying(金币+10): 谢谢 2011-03-23 10:23:05
浑浊的原因应该是细菌污染了,真菌和支原体污染一般是不会出现浑浊的。
细菌污染相对是最好处理的,
换液,用PBS洗涤细胞一次后添加双抗量到正常使用量的5-10X培养12-24小时后观察,要是细菌已杀死即可洗涤换回正常培养程序;若还有污染可以洗涤后继续高双抗量培养,直至污染控制住了。
2楼2011-03-23 10:20:41
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jyy_204

至尊木虫 (职业作家)


★
daiguoying(金币+3):谢谢参与
daiguoying(金币+5): 2011-03-23 10:49:52
这种情况显然是污染了,我们一般是直接弃去,重新复苏,因为继续培养可能会影响你的其他细胞。
3楼2011-03-23 10:30:31
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jyy_204

至尊木虫 (职业作家)


引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-03-23 10:20:41:
浑浊的原因应该是细菌污染了,真菌和支原体污染一般是不会出现浑浊的。
细菌污染相对是最好处理的,
换液,用PBS洗涤细胞一次后添加双抗量到正常使用量的5-10X培养12-24小时后观察,要是细菌已杀死即可洗涤换回 ...

那如果是真菌或支原体污染怎么办呢
4楼2011-03-23 10:31:39
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VIP

银虫 (职业作家)


★
daiguoying(金币+3):谢谢参与
细菌污染
5楼2011-03-23 10:41:02
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daiguoying

木虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by jyy_204 at 2011-03-23 10:30:31:
这种情况显然是污染了,我们一般是直接弃去,重新复苏,因为继续培养可能会影响你的其他细胞。

我想研究一下怎么回事,等实在没办法再弃去,另,为什么会影响其他细胞?
6楼2011-03-23 10:49:27
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yixinling

金虫 (正式写手)


★
daiguoying(金币+3):谢谢参与
daiguoying(金币+5): 2011-03-23 14:50:00
引用回帖:
Originally posted by jyy_204 at 2011-03-23 10:31:39:
那如果是真菌或支原体污染怎么办呢

真菌或者支原体的话,真菌我不太清楚,不过支原体也有相应的杀灭的药,先用高浓度洗下,再混培养基培养直至检测无支原体就可以了。
影响其他细胞的原因是细菌会随气溶胶到处漂,会污染,所以建议还是弃取重新复苏吧。
8楼2011-03-23 13:11:37
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\\\'Artemis

新虫 (小有名气)


★
daiguoying(金币+3): 谢谢参与
引用回帖:
2楼: Originally posted by jhu132llh at 2011-03-23 10:20:41
浑浊的原因应该是细菌污染了,真菌和支原体污染一般是不会出现浑浊的。
细菌污染相对是最好处理的,
换液,用PBS洗涤细胞一次后添加双抗量到正常使用量的5-10X培养12-24小时后观察,要是细菌已杀死即可洗涤换回正 ...

你好,请问如何判断细菌已经杀死?
9楼2018-05-09 10:32:50
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简单回复
2011-03-23 11:02   回复  
daiguoying(金币+3):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-03-23 10:20:41: 浑浊的原因应该是细菌污染了,真菌和支原体污染一般是不会出现浑浊的。 细菌污染相对是最好处理的, 换液,用PBS洗涤细胞一次后添加双抗量到正常使用量的5-10X培养12-24小时后观察,要是细菌已杀死即可洗涤换回 ...

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