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山果果

新虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC 分析中,如何将三个保留时间值很近的东西分开~~已有30人参与

如题,这两天算是焦头烂额了。
有三个结构很相近的酸性有机物,是标准品,怎么也分不开,要么分开了但峰形很差。开始用的流动相是water:ACN=10:90,用磷酸调节ph到2.5,峰形很好,但其中三个的保留值就差1左右,混合后上液相就无法分开了,结果增加了水的比例到80,峰形又不好了还有什么方法不?
我是新手,大家多赐教啊,感激不尽!
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zhengxim

木虫 (正式写手)

★ ★
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opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-03-24 21:18:02
引用回帖:
Originally posted by 山果果 at 2011-03-23 07:26:07:
如题,这两天算是焦头烂额了。
有三个结构很相近的酸性有机物,是标准品,怎么也分不开,要么分开了但峰形很差。开始用的流动相是water:ACN=10:90,用磷酸调节ph到2.5,峰形很好,但其中三个的保留值就差1左右 ...

建议更换流动相或用正相色谱试试看
啊啊啊
2楼2011-03-23 07:58:26
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小醇醇

木虫 (正式写手)

攀登者~

★ ★
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opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-03-24 21:18:09
调到80的话
ph也调到2.5
峰形就不好了?
换柱子试试要不
即使是走过无数次的路,也能走到从未踏足过的地方;正因为是走过无数次的路,景色才会变幻万千
3楼2011-03-23 08:18:16
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白纸一张

新虫 (初入文坛)

可不可以降流速呢?
4楼2011-03-23 08:56:34
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pili2009

银虫 (小有名气)

★ ★
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opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-03-24 21:18:19
分不开的情况下,你可以看调整流动相比例,调整PH值,调整柱温,改变检测器波长,换柱子来调整。
5楼2011-03-23 09:38:19
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dreamsnow200428

木虫 (小有名气)



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什么物质?二元酸?选柱子很重要。。。
6楼2011-03-23 10:53:44
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1414671343

金虫 (正式写手)

脑子有病

离子型色谱
7楼2011-03-23 11:03:31
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yz2007433052

木虫 (职业作家)

★ ★
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opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-03-24 21:18:36
梯度淋洗不行么啊??你可以试一试其他的流动相~~水和其他的试剂 还有就是把柱控制一下 柱压应该减小一点吧~~
激浪青春!
8楼2011-03-23 11:07:50
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山果果

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by dreamsnow200428 at 2011-03-23 10:53:44:
什么物质?二元酸?选柱子很重要。。。

多谢!是黄酮类的物质,结构很相似~~
9楼2011-03-23 15:29:49
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山果果

新虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhengxim at 2011-03-23 07:58:26:
建议更换流动相或用正相色谱试试看

呵呵,谢谢,不过实验室没有正向柱啊貌似~~
10楼2011-03-23 15:30:51
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