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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】转化效率

在转化农杆菌的时候,涂布的三抗平板上载36h的时候长满一层,用的是冻融法,转化效率应该没那么高,不知道是什么原因,求大侠指导,很着急啊

[ Last edited by 1949stone on 2011-3-16 at 11:40 ]
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zdq516122164

新虫 (小有名气)


liaoyh(金币+1): 2011-03-16 11:00:29
liaoyh(金币+1): 2011-04-25 23:21:25
药品失效了?
2楼2011-03-16 10:21:35
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magy2006

木虫 (著名写手)


liaoyh(金币+1): 2011-03-16 11:00:24
liaoyh(金币+1): 2011-04-25 23:21:32
加一些利福平,应该是有杂菌了
利福平可以一定程度抑制杂菌
3楼2011-03-16 10:38:46
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by liaoyh at 2011-03-16 10:15:45:
在转化农杆菌的时候,涂布的三抗平板上载36h的时候长满一层,用的是冻融法,转化效率应该没那么高,不知道是什么原因,求大侠指导,很着急啊

抗生素应该没有失效,用无抗性的做过实验了
4楼2011-03-16 10:59:09
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by magy2006 at 2011-03-16 10:38:46:
加一些利福平,应该是有杂菌了
利福平可以一定程度抑制杂菌

我加的抗生素是庆大霉素,利福平,卡那霉素
5楼2011-03-16 11:00:05
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)


liaoyh(金币+1): 2011-03-16 19:52:43
liaoyh(金币+1): 2011-04-25 23:21:39
转化的时候少加些质粒试试看
6楼2011-03-16 16:15:31
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liaoyh(金币+1): 2011-03-16 19:51:51
liaoyh(金币+1): 2011-04-25 23:21:43
24h小时之内如果没有长出来估计就不行了;36h小时可能长出来的是杂菌或者抗生素的抗性降低导致别的菌也长出来了!
7楼2011-03-16 17:13:06
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-03-16 17:13:06:
24h小时之内如果没有长出来估计就不行了;36h小时可能长出来的是杂菌或者抗生素的抗性降低导致别的菌也长出来了!

农杆菌在板上24h好像长不出来的
8楼2011-03-16 19:51:45
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by lixg at 2011-03-16 16:15:31:
转化的时候少加些质粒试试看

冻融法转化的效率不高
9楼2011-03-16 19:52:31
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张静_1024

银虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
668756楼: Originally posted by liaoyh at 2011-03-16 10:15:45:
在转化农杆菌的时候,涂布的三抗平板上载36h的时候长满一层,用的是冻融法,转化效率应该没那么高,不知道是什么原因,求大侠指导,很着急啊

请问冻融技术具体是什么,怎么个操作步骤呢?
10楼2012-04-27 16:31:35
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