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wuzunfeng416

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】土壤真菌PCR已有6人参与

最近再批土壤真菌，没条带，望大家提提建议，用的引物是NS1F和NS8R

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1楼2011-03-15 14:08:23

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bear0329

金虫 (正式写手)

应助: 13 (小学生)
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性别: GG
专业: 环境微生物学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

10楼: Originally posted by hc1027 at 2011-08-04 21:21:34:
我也提了好几次，效果总是不好，有时根本提不出来。
想请教下细节方面，希望指点：
1、加氯仿异戊醇后混匀是涡旋还是轻轻颠倒混匀，涡旋会使DNA断裂吗？离心速度和时间是多少？
2、70%乙醇洗沉淀如何进行？是 ...

1.加氯仿异戊醇时都要缓慢，颠倒混匀即可，13000rpm 10min
2.洗完沉淀后，13000rpm 10min，去上清
3.离心管倒扣在吸水纸上，然后可以用移液枪小心把多余残留的酒精吸掉，在无菌操作台上吹干或者打开盖子在4℃冰箱过夜即可
4.最后用无菌超纯水溶解即可