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[交流]
【求助/交流】有使用过λDE3溶源化试剂盒的进来看看...
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有没有人用过λDE3 lysogenization kit制备过溶源化菌的 求教一下，需要注意点什么啊 做了几次一直没有成功 很郁闷 ..... |
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 分子生化实验经验积累 |
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nestzhao(金币+3): 2011-03-16 21:04:26
rainwander(金币+3): 鼓励分享自己的实验经验~不错 2011-03-16 22:38:46
nestzhao(金币+3): 2011-03-16 21:04:26
rainwander(金币+3): 鼓励分享自己的实验经验~不错 2011-03-16 22:38:46
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我找了下实验记录， 我的步骤是，OD长到0.5左右后， 3）取1uL菌液与1 uL ƛDE3 phage lysate，3.3 ul helper phage lysate，1 uL selection phage lysate于37 ℃水浴30 min。（由于所取三种裂解液量较少，可事先取一定体积的三种裂解液混匀，使用时取所需的量） 4）加入100 uL的LB培养基稀释后梯度涂布LB平板，37 ℃培养过夜 一般10 uL菌液能长出比较适合的菌落数。菌落长得少打点，你就可以看到未溶原化的菌落出现噬菌斑，溶原化成功的菌落就比较圆滑。 你如果完全按照说明书做，肯定长得密密麻麻，看不到噬菌斑。 |
6楼2011-03-16 14:09:00
2楼2011-03-15 11:02:14
3楼2011-03-15 17:47:28
4楼2011-03-15 22:13:14
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