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nhwslyt

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助】【求助】请问:用细胞进行含药血清的体外药效评价,应该选用共培养,还是预培

各位好,我们正在进行一个关于“血清药理学”的实验,用细胞评价含药血清的体外药效。我们以H2O2为模型药,想建立氧化损伤模型,从而考察药物的抗氧化损伤作用。在我们的实验中我们将H2O2与含药血清同时作用于细胞,结果发现空白血清本身具有很强的抗氧化性(即清除H2O2的作用),使我们的实验结果出现假阳性(所有实验组的细胞的存活率都显著提高,并且存活率几乎都在同一个水平),很明显细胞存活率升高可能并不是药物发挥的抗氧化作用,而是血清本身具有的抗氧化作用,所以它们的水平很一致。

为了探讨血清的抗氧化作用,我们做过这样一个实验:细胞培养48h后,分别设空白对照组,a系列H2O2组(设5个损伤浓度600,1000,1200,1600,2000uM),b系列H2O2组(设5个损伤浓度600uM+5%空白血清,800uM+5%空白血清,1000uM+5%空白血清,1600uM+5%空白血清,2000uM+5%空白血清),作用4h,检测细胞存活率发现:a系列H2O2组从1200uM开始H2O2对细胞的损伤与正常对照组相比具有统计学差异,而b系列H2O2组细胞的存活率比同浓度的a系列H2O2组高得多。

我们采取共培养的方式(含药血清与H2O2同时作用于细胞)考察含药血清的抗氧化作用,由于血清本身抗氧化作用的干扰,使我们无法检测出含药血清的真正作用,现在实验难开展下去。曾经看到一些关于“血清药理学”的体外药效评价实验用的是预培养,即现有含药血清作用细胞,然后再加H2O2损伤,但是对于血清药理学来说,预培养有意义吗?请问各位是怎样看待这个问题的?望各位赐教。感谢您们。
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shen.wei

新虫 (初入文坛)



nhwslyt(金币+1):谢谢参与
nhwslyt(金币+1): 您分析得有道理,不过要找到这种酶也不太容易,O(∩_∩)O谢谢。。。。 2011-03-13 19:45:55
血清的抗氧化作用是否是某种还原酶起作用,能否在血清中加入该酶的抑制剂然后进行给药的细胞培养?
2楼2011-03-12 21:52:32
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晨曦2014

金虫 (著名写手)



nhwslyt(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by shen.wei at 2011-03-12 21:52:32:
血清的抗氧化作用是否是某种还原酶起作用,能否在血清中加入该酶的抑制剂然后进行给药的细胞培养?

剂量有待探讨
3楼2011-06-21 08:57:27
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15659121796

新虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是做细胞氧化模型的。针对您的帖子我的建议是可以不选择共培养的方式,可以先加药物作用2h,再加过氧化氢。可以思考思考,不要急着采纳。


我想请问您,您的过氧化氢是用超纯水稀释的吗?稀释的时候混匀会不会造成双氧水分解?
4楼2017-07-01 16:47:37
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