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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】NF-κB用什么方法测比较好？
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草影花飘

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】NF-κB用什么方法测比较好？ 已有9人参与

我是一个药理学硕士生，想测大鼠腹主动脉上的NF-κB指标，我看很多国内文献上都是用免疫组化的方法测的，国外的文献基本上都是用Western Blotting测的，我听人说免疫组化是半定量的方法，染色出来的切片效果会不太好，而Western Blotting是定量方法，但价格昂贵，老板不让用，请问我应该选什么方法比较适合呢？
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1楼 2011-03-10 18:47:16
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faith_hao

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by xhjggl at 2011-04-01 21:40:39
可以用上海生工的试剂盒，再做WESTERN BLOT

细胞核蛋白/浆蛋白抽提试剂盒
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit       
产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和胞质蛋白，提取制备 ...

提取的核蛋白可以做ELISA吗？ELISA检测转录因子的具体步骤跟一般测上清有什么区别？
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我未曾见过一个早起、勤奋、谨慎、诚实的人抱怨命运不好；良好的品格，优良的习惯，坚强的意志，是不会被假设所谓的命运击败的。——《富兰克林自传》
8楼2013-05-06 09:11:39
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pxhcooh

金虫 (正式写手)
像类似的转录因子，用wb都不好做的，还是用ELISA
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2楼2011-03-11 19:16:54
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草影花飘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by pxhcooh at 2011-03-11 19:16:54:
像类似的转录因子，用wb都不好做的，还是用ELISA

那用ELISA做的话，需要先进行核蛋白提取的步骤吗
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3楼2011-03-14 22:49:33
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pier_829

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
NF-kappaB 最好的方法是EMSA，这是最经典的，因为可以测出NF-kappaB的活性
现在也有很多的文献用的是western-blot的方法，但是因为NF-kappaB是一个核转录因子，所以需要分别测细胞质蛋白和细胞核蛋白中的表达量
至于elisa吧，NF-kappaB的盒子现在也有了，但是我自己没做过，不好说，但是肯定价格比较贵
免疫组化的话结果比较主观，但是阳性结果也不是那么好做出来的
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4楼2011-03-29 14:24:04
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