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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】圆二色谱验证酶切反应的发生
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jingNO.1

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】圆二色谱验证酶切反应的发生

有谁做过用圆二色谱验证DNA被限制性内切酶切割的实验？实验过程是什么呀？麻烦问一下由于核酸切割酶中一般都含有蛋白，在扫圆二时在220-240nm处的负峰特别强，这会影响DNA的峰，这个问题如何处理？还有为啥在DNA中加入酶以后，由于酶切作用，DNA的旋光性会发生变化反应出来是圆二波普峰位的变化，为啥在加入切割酶后特定峰位本该降低的，却升高了？急！谢谢。。。
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1楼 2011-03-10 18:00:26
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lzj06181234

金虫 (小有名气)
jingNO.1(金币+5): 2011-03-16 15:52:47
CD主要是用来研究分子的立体结构，pro有helix，220有负峰正常，以同浓度的酶扫基线，然后相减。DNA由于糖的不对称性，还有双螺旋的不对称性，才会有圆二色性，被酶切后，应该240峰值会变化，但由于酶切后DNA片段可能会出现自连等的情况，所以，结果会有干扰。
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2楼2011-03-16 13:53:30
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