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jingNO.1

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】圆二色谱验证酶切反应的发生

有谁做过用圆二色谱验证DNA被限制性内切酶切割的实验?实验过程是什么呀?麻烦问一下由于核酸切割酶中一般都含有蛋白,在扫圆二时在220-240nm处的负峰特别强,这会影响DNA的峰,这个问题如何处理?还有为啥在DNA中加入酶以后,由于酶切作用,DNA的旋光性会发生变化反应出来是圆二波普峰位的变化,为啥在加入切割酶后特定峰位本该降低的,却升高了?急!谢谢。。。
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lzj06181234

金虫 (小有名气)


jingNO.1(金币+5): 2011-03-16 15:52:47
CD主要是用来研究分子的立体结构,pro有helix,220有负峰正常,以同浓度的酶扫基线,然后相减。DNA由于糖的不对称性,还有双螺旋的不对称性,才会有圆二色性,被酶切后,应该240峰值会变化,但由于酶切后DNA片段可能会出现自连等的情况,所以,结果会有干扰。
2楼2011-03-16 13:53:30
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