| 查看: 7740 | 回复: 5 | |||
[交流]
【求助/交流】RNA抽提260/230比值很小 已有5人参与
|
| 用Tirzol抽提组织总RNA，几次试验结果260/280比值和电泳图的结果都还不错，没有蛋白质和DNA的污染，但260/230比值都只在0.5左右，这是什么原因？？？？ |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有223人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 柞蚕总RNA提取中，蛋白抽提不尽
已经有12人回复
- RNA提取
已经有5人回复
- 关于RNA提取的问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】RNA抽提
已经有4人回复
- 【求助/交流】RNA提取结果分析
已经有42人回复
- 【求助/交流】关于RNA提取的
已经有20人回复
- 有关RNA提取的问题
已经有12人回复
- RNA提取
已经有31人回复
gaoyang636
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 202 (大学生)
- 金币: 4111.4
- 散金: 7
- 红花: 14
- 帖子: 1108
- 在线: 159.8小时
- 虫号: 384065
- 注册: 2007-05-27
- 专业: 基因组学
2楼2011-03-10 19:00:21
3楼2011-03-24 14:31:10
4楼2011-03-24 20:10:26
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+8): 谢谢交流 2011-03-25 08:25:14
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+8): 谢谢交流 2011-03-25 08:25:14
|
前几天有人问过类似问题了。 260/230的值，一般不要小于2.0，小的话表明有异硫氰酸胍，β-巯基乙醇或乙醇的残留。补救的方法是再沉淀一次，然后重复乙醇洗涤的过程。但从我的经验看，后面RNA丢得很多……因此提RNA时就注意了 个人经验，260/230偏小的话，提取时可以改进以下几点： 1. 加氯仿抽提后取少一点上清，不要贪多。 2.加乙醇洗的时候，多晃几次，尽量让RNA沉淀整片悬浮起来（有时候确实浮不起来也没办法。） 3.弃乙醇的时候，用枪吸而不是倾倒，倒的话经常有液滴留在管壁上，倒不干净。第一次用蓝枪头吸，可以不完全吸干，免得吸到沉淀；然后短暂离心把残余酒精甩到管底，看准了用白枪头尽量吸干净。RNA量大，被白枪头弄掉一点也没关系。 4.溶解前晾干的时间可以长一点，5分钟也没关系的。标准的做法说是不能晾太久，等沉淀开始变透明就要加水溶解，但是我晾过10分钟的，后面RNA量也很大。可能量大，虽然有些溶解不了，最后浓度还是高。 可能不完全正确，但是以前我出现过260/230偏小的问题，按上面方法改进了操作，后面就好了。 还有一种原因可能是多糖类杂质残留，可试试用LiCl沉淀。 |
5楼2011-03-24 22:01:08
6楼2013-05-15 16:37:33
