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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 【求助】多糖sevage法除蛋白后252仍有吸收
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zhangyanjjgg

无虫

[交流] 【求助】多糖sevage法除蛋白后252仍有吸收

我在做植物多糖除蛋白，sevage法两项交界处已经看不到变性蛋白了，可是UV扫描时除了200左右的糖峰，在252左右还有一个小一些的峰，两峰比值0.3，我的糖溶液有颜色。
请问大家252这个峰可能是什么呢？蛋白？核酸？还是色素？有什么方法可以出去呢？谢谢啦
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1楼 2011-03-01 14:41:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

七AND七

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
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引用回帖:
1256337楼: Originally posted by vennie at 2011-04-16 19:28:28:
我也是用sevage法除蛋白的除了7-8次，然后用双氧水法脱色，在透析，能得到纯度比较高的多糖

请问你在用Sevage法除蛋白时，振摇后会不会出现乳化？我大概100ml多糖也加入Sevage试剂后在分液漏斗中振摇后溶液全部变成了白色乳状，而且只能用离心才能使他们分为两层，下层就全部是白白的东西根本看不见大家所说的中间那层，我想知道变性蛋白到底是什么状态的？
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9楼2012-04-03 16:32:05
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普通回帖

nnw3627230

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
zhangyanjjgg(金币+1): 2011-03-12 10:42:06
多除几次蛋白
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2楼2011-03-08 21:45:09
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zhangyanjjgg

新虫
引用回帖:
Originally posted by nnw3627230 at 2011-03-08 21:45:09:
多除几次蛋白

谢谢。
不过sevage已经没现象了，用活性炭脱了一下色，两峰比例有所下降，可能是色素。
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3楼2011-03-12 10:43:23
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liu200479

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
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zhangyanjjgg(金币+1): 2011-03-24 13:29:27
qinhy(金币+1): O(∩_∩)O谢谢~~~ 2011-04-17 18:17:27
sevag法的优势在于除多糖比较柔和，不会使多糖降解，
sevag法脱蛋白还会有蛋白剩余，多几次即可
多糖的色素分为两类：与多糖结合的结合型色素得用离子胶束除去，用活性碳除不了，但也要根据实际情况而定
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4楼2011-03-22 23:57:45
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zhangyanjjgg

新虫
引用回帖:
Originally posted by liu200479 at 2011-03-22 23:57:45:
sevag法的优势在于除多糖比较柔和，不会使多糖降解，
sevag法脱蛋白还会有蛋白剩余，多几次即可
多糖的色素分为两类：与多糖结合的结合型色素得用离子胶束除去，用活性碳除不了，但也要根据实际情况而定

如果多除很多遍，sevag最终能够除去所有蛋白吗？包括结合蛋白
下面做的一种动物多糖，蛋白需要除的很干净，所以想先用蛋白酶酶解一下，能帮我推荐几种蛋白酶吗？希望尽可能彻底的酶解蛋白
非常感谢
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5楼2011-03-24 13:29:08
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vennie

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
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qinhy(金币+1): O(∩_∩)O谢谢~~~ 2011-04-17 18:17:38
我也是用sevage法除蛋白的，然后用双氧水法脱色，在透析，能得到纯度比较高的多糖
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6楼2011-04-16 19:26:26
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vennie

超级版主

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karl2100(金币+1): 谢谢发言！ 2011-04-16 20:40:14
zhangyanjjgg(金币+1): 谢谢啦 2011-05-01 21:00:30
我也是用sevage法除蛋白的除了7-8次，然后用双氧水法脱色，在透析，能得到纯度比较高的多糖
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7楼2011-04-16 19:28:28
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星辰89

主管区长

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangyanjjgg at 2011-03-12 10:43:23:
谢谢。
不过sevage已经没现象了，用活性炭脱了一下色，两峰比例有所下降，可能是色素。

不一定的，因为活性炭吸附的东西比较多，可能只是吸附走了一些你要得东西，并不定是色素的。而且用活性炭，多糖损失比较大。
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8楼2011-11-25 09:55:43
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zcczj

专家顾问

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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1256312楼: Originally posted by vennie at 2011-04-16 19:26:26:
我也是用sevage法除蛋白的，然后用双氧水法脱色，在透析，能得到纯度比较高的多糖

双氧水脱色怎样的条件啊你，不怕多糖降解？
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10楼2012-04-05 16:30:12
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liweidsq

主管区长

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以尝试下木瓜蛋白酶 这个中性的蛋白酶~最好根据你的多糖的提取方式来选择相应的蛋白酶来除蛋白
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11楼2013-04-27 22:18:57
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