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王有朝

新虫 (小有名气)

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在线: 30.2小时
虫号: 520934

[交流] 【求助/交流】关于基因扩增的问题

NCBI上的序列是cDNA序列还是全基因组序列？如果我想扩增鱼的Beta-actin基因，按NCBI上序列设计一对引物，那么用作原料的鱼类肌肉提取DNA后是否还得反转录才能进行扩增？
谢谢高手指点！

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1楼 2011-03-01 13:41:11

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zy020202

金虫 (正式写手)

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王有朝(金币+2): 谢谢 2011-03-04 21:39:52

引用回帖:

Originally posted by 王有朝 at 2011-03-03 17:08:06:
我分子学的不好啊。我的意思是DNA不是包含内含子吗。
NCBI给出的序列包括内含子序列吗？如果包括内含子序列那么我们对一个基因扩增是不是要提取全RNA反转录成cDNA后再对这一基因进行扩增？还是直接通过NCBI上的 ...

嗯，有的不包括5‘上游和3’下游的非编码区，我是用于包装病毒，这两个区对病毒粒子很重要的，所以提取RNA后反转录成cDNA，再构建质粒转染包装病毒粒子，你的情况具体分析下吧，我了解也不是很深！