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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】MTT法确定药物对细胞的作用浓度范围 结果如何分析
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amaya1545

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】MTT法确定药物对细胞的作用浓度范围 结果如何分析

大家好，现在通过细胞，做MTT，筛选药物作用的浓度范围，有些问题不明白，想请教大家

   1. 不同药物浓度，  MTT 测OD值后，算出OD平均值，能否说 OD值小于空白对照的就是药物对细胞生长有抑制，大于空白对照的就是促进生长吗？ MTT是否要选出几乎对细胞没有影响的药物范围还是怎样？
   2. 抑制率为多大是，说明药物对细胞有毒性？
   3. 同1，选出的药物范围对细胞几乎没有影响（能说没有差异性嘛？），下面设置高中低浓度做进一步实验时，是否要药物对细胞作用没有差异性，这样要检测的指标才有意义？
   4. MTT结果，我看到有的进行了单因素分析，有必要吗？还是就浓度-抑制率做个曲线，求出IC50就好了？ 顺便弱弱的问问，IC50求出后，是否就代表2IC50就是药物的毒性浓度？

     关于MTT筛选浓度，还有什么我没有考虑到的，希望各位给提个意见，想尽早筛出浓度范围，进行下面实验，谢谢各位了

    期待各位的回答  急待。。。。。。。。
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1楼 2011-02-28 08:58:22
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cuier124

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5): 鼓励新虫交流， 2011-02-28 16:44:14
amaya1545(金币+2): 2011-02-28 23:02:24
引用回帖:
Originally posted by amaya1545 at 2011-02-28 08:58:22:
大家好，现在通过细胞，做MTT，筛选药物作用的浓度范围，有些问题不明白，想请教大家

   1. 不同药物浓度，  MTT 测OD值后，算出OD平均值，能否说 OD值小于空白对照的就是药物对细胞生长有抑制，大于空白对照的 ...

不用算IC50。
半数抑制浓度(IC50)指在用药后存活的细胞数量减少一半时所需的药物浓度。在MTT法中，就是以对照组吸光度OD值减少一半所需的药物浓度为Ic50，除此以外，半数抑制浓度的含义还相当于药物对培养细胞的最小致死剂量的平均值，作为反映药效的定量指标。
将对照组细胞存活率看做100%，药物各浓度组的细胞存活率与之比较，差别有显著性（P<0.05）说明对细胞存活有影响。药物各浓度组的细胞存活率=(各浓度组吸光值／对照组吸光值)×100％。
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3楼2011-02-28 14:36:44
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lijunhu

铜虫 (小有名气)
MTT实验过程中，细胞增殖越多越快，则吸光度越高。细胞毒性越大
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2楼2011-02-28 11:55:49
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amaya1545

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cuier124 at 2011-02-28 14:36:44:
不用算IC50。
半数抑制浓度(IC50)指在用药后存活的细胞数量减少一半时所需的药物浓度。在MTT法中，就是以对照组吸光度OD值减少一半所需的药物浓度为Ic50，除此以外，半数抑制浓度的含义还相当于药物对培养细胞 ...

怎么算是否显著性差异呢？  网上介绍了很多 但是 不太会用

   我有7个不同浓度组，一个阳性对照，一个阴性对照，n=5 ，具体要怎么分析呢？谢谢
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4楼2011-02-28 23:17:04
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cuier124

金虫 (初入文坛)
amaya1545(金币+2): 2011-03-01 15:26:59
引用回帖:
Originally posted by amaya1545 at 2011-02-28 23:17:04:
怎么算是否显著性差异呢？  网上介绍了很多 但是 不太会用

   我有7个不同浓度组，一个阳性对照，一个阴性对照，n=5 ，具体要怎么分析呢？谢谢

你先把各组的细胞存活率算出来，药物各浓度组分别与空白对照组（不加任何药，正常培养的细胞）比较，用t检验法，SPSS软件可以分析，得得出的p值小于0.05时差异显著
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5楼2011-03-01 10:59:39
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