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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问含PET载体的DH5a甘油保存浓度应是多少
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问含PET载体的DH5a甘油保存浓度应是多少 已有8人参与

如题，新手。
分子克隆实验指南里菌株的甘油保藏法的甘油浓度为15%，但是上网查了，又有人说甘油浓度太大，质粒容易丢失，应该在10%一下。请教各位虫虫，平时操作时候，都是用的多达浓度甘油啊？特别是冻存含PET质粒的菌株的童鞋们。3Q~
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1楼 2011-02-21 10:22:43
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-02-21 12:22:56

以前我也搜索了下，的确说法都不同，好像还有说8%的浓度效果最好。
个人理解是可能是没有说清楚到底是在-20℃保存还是-80℃。一般-80℃保存的话，最好浓度高点，至少20%，因为-80%下更容易形成冰晶。
不过我都用20%的浓度，没出过问题。
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Thank-you，so-blue.
2楼2011-02-21 10:49:55
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
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silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-02-21 12:23:13

好像没有一个标准的浓度吧，不过保存到-70度应该没有什么问题，也可以把甘油和培养基混合起来进行保存，或者用低脂牛奶进行保存！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-02-21 11:02:22
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-02-21 02:49:55:
以前我也搜索了下，的确说法都不同，好像还有说8%的浓度效果最好。
个人理解是可能是没有说清楚到底是在-20℃保存还是-80℃。一般-80℃保存的话，最好浓度高点，至少20%，因为-80%下更容易形成冰晶。
不过我都 ...

你的20%甘油冻存液是放到-80度冰箱吗
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4楼2011-02-21 15:09:01
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-02-21 17:13:42
引用回帖:
Originally posted by baby1_9253344 at 2011-02-21 07:09:01:
你的20%甘油冻存液是放到-80度冰箱吗

我不管-20℃还是-80%，统一都用20%甘油保种，没出过什么问题。
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Thank-you，so-blue.
5楼2011-02-21 16:29:44
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
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rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-02-21 17:13:49

我一般保存pET系列都是10%甘油 -80℃，表达没有任何问题。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2011-02-21 16:31:28
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ottolzm

木虫 (正式写手)

15%到20%都行 我们实验室使用的这种浓度范围 还没出现过问题
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7楼2011-02-21 19:30:39
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★ ★
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scelab(金币+1): 正解 2011-02-22 08:42:43

10%-50%都可以，没啥具体要求
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会当凌绝顶，一览众山小
8楼2011-02-22 02:08:33
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tobegood

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
9楼2011-03-06 18:13:59
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翱宇

禁虫 (正式写手)

将军
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们一般配置40%的甘油，灭菌后保存起来，保存菌种时，取800ul菌液，400ul的40%的甘油，混匀放置-70就没有问题了。这个应该浓度的问题应该不大！
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10楼2011-03-06 18:26:45
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