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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】做酵母的虫虫们帮忙看一下~

需要按照文献培养带有某种质粒的酿酒酵母(S. cerevisiae),让它表达出特定蛋白,这时候用的培养基和普通YPD不一样,如原文描述:

"...studies were cultured in URA+ selective dextrose (SD)
medium (0.7% [w/v] Difco yeast nitrogen base, 2% [w/v] glucose, 0.005%
[w/v] adenine hemisulfate, and each of L-histidine, L-tryptophan and
L-leucine at concentration of 0.003% [w/v])."

查了《分子克隆实验指南》里面的SD培养基中的氮源好像是无氨基酸的,文献里的酵母氮源并没有特指without amino acid,那应该是什么样的呢,还有,搞不清楚什么是“URA+ selective dextrose”,URA+的意思。

还请各位做酵母的童鞋帮忙翻译一下...弄清楚了好订购培养基。。。。
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
baby1_9253344(金币+1): 3Q 2011-02-21 09:19:23

要知道酵母里的是什么质粒
3楼2011-02-20 12:30:51
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查看全部 10 个回答
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-02-19 22:05:23
baby1_9253344(金币+1): 谢谢详细解答! 2011-02-21 09:19:06

SD培养基中的氮源是一种无氨基酸的氮源,试剂公司有的卖,YNB,买的时候记得弄清楚是否已经添加了硫酸铵。
URA+,指该实验中用到的酿酒酵母菌株是URA缺陷型,用SD筛选培养基时,需要添加URA.
2楼2011-02-19 21:56:18
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by gongeleven at 2011-02-20 04:30:51:
要知道酵母里的是什么质粒

质粒p416GPD,centromeric plasmid
4楼2011-02-20 16:13:55
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lwenshan

木虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
baby1_9253344(金币+1): 多谢~可惜刚才上Invitrogen官网,打不开,不晓得怎么下载相关资料了。。。 2011-02-21 09:20:08
dhd997(金币+2): 热心鼓励 2011-02-21 09:26:32

按照你给的参考文献,你的菌株可能是ura-,his-,try-,leu-的菌株,你的载体可能有URA选择标记,那么培养基中的YNB肯定是无氨基酸的,但是为啥没写加入ura的量呢?酿酒酵母相关知识你可以下载Invitrogen的酿酒酵母表达载体相关资料
5楼2011-02-20 20:09:29
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