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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】GPC不出峰
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fisher850

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】GPC不出峰

我们新买了一个GPC的柱子配平时的HPLC使用，可是换上GPC的柱子后就是不出峰，换回原来的柱子就正常，换上GPC的柱子就不行。
尝试不接柱子直接连检测器，就可以出峰，因此不是检测器的问题，流动相用的是水，进的是PEG20000的，1%的溶液，进了5ul，1ml/min的流速也不慢了啊，一个半小时都没反应，真是急死我了，有高手来讨论一下，是不是柱子有问题啊，毕竟第一次用。
谢谢大伙啦！



补充一下：
我用的是CoM6000系列(应该这么写吧……汗一个先……）
色谱柱是O Hpak SB-803 HQ 理论塔板数大于等于16000
分析条件是：流动相为水，流量为1.0ml/min，蒸发光检测器，进样量为5~15ul
检测的样品是PEG，标准物质就是PEG，不存在样品降解或检测器无响应的情况，因为用普通柱子都试过，出峰的。
再次辛苦大伙了：）

[ Last edited by fisher850 on 2011-2-21 at 08:21 ]
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1楼 2011-02-18 15:34:14
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谷峰

至尊木虫 (著名写手)
★
fisher850(金币+1):谢谢参与
柱子对样品吸附？
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2楼2011-02-18 15:46:37
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tangbohejin

木虫之王 (文学泰斗)
★
fisher850(金币+1):谢谢参与
从厂家再换一根？？
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3楼2011-02-18 15:48:20
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xx小小xx

木虫 (著名写手)
★ ★
fisher850(金币+1):谢谢参与
pplover(金币+1): 估计人家是新手，不太了解。 2011-02-18 20:52:07
你这什么都不写清楚，叫别人怎么帮忙啊
色谱仪、柱子、检测器的型号参数都写出来啊
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4楼2011-02-18 15:50:03
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冰醋酸

银虫 (小有名气)
★
fisher850(金币+1):谢谢参与
与厂家联系一下！
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5楼2011-02-18 15:51:10
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herenren

禁虫 (著名写手)
★
fisher850(金币+1):谢谢参与
本帖内容被屏蔽
6楼2011-02-18 15:54:51
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sq201

木虫 (小有名气)
★ ★
fisher850(金币+1):谢谢参与
pplover(金币+1): 感谢交流。 2011-02-18 20:52:28
检查一下你买的柱子，看看型号对不对？你应该买渗透极限比20000还要大的GPC吧。若果比20000小是不是出峰的
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7楼2011-02-18 15:58:32
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fisher850

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xx小小xx at 2011-02-18 07:50:03:
你这什么都不写清楚，叫别人怎么帮忙啊
色谱仪、柱子、检测器的型号参数都写出来啊

嘿嘿,真的是新手哦
我用的是CoM6000系列(应该这么写吧……汗一个先……）
色谱柱是O Hpak SB-803 HQ 理论塔板数大于等于16000
分析条件是：流动相为水，流量为1.0ml/min，蒸发光检测器，进样量为5~15ul
检测的样品是PEG，标准物质就是PEG，不存在样品降解或检测器无响应的情况，因为用普通柱子都试过，出峰的。
再次辛苦大伙了：）

[ Last edited by fisher850 on 2011-2-21 at 08:22 ]
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8楼2011-02-21 08:20:06
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fisher850

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sq201 at 2011-02-18 07:58:32:
检查一下你买的柱子，看看型号对不对？你应该买渗透极限比20000还要大的GPC吧。若果比20000小是不是出峰的

买之前厂家那边用PEG做过测试，说是好用的，给的条件就是我上面写的那些，在5~8min之间就出峰了，可是我都走了100min了，也没个反应……真是郁闷啊……渗透压是不是理论塔板数？是大于等于16000的，他们测试的时候就是用PEG20000做的，出峰的啊……真的困惑，要是柱子的问题就得赶快联系厂家更换了。
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9楼2011-02-21 08:25:33
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shangguan2806

木虫 (小有名气)
★
fisher850(金币+1):谢谢参与

延长一下分析时间，看出不出峰。看你那个柱子理论塔板数比较大，可能吸附性比较强，你分析的东西可能不适合用这种吸附性强的柱子。
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10楼2011-02-21 10:38:49
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fisher850

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by herenren at 2011-02-18 07:54:51:
大概率是吸附在柱子里了
你分析的是啥物质

额,我分析的是PEG,基准物质的分子量分别从400~20000.
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11楼2011-02-21 14:32:04
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)
★
fisher850(金币+1):谢谢参与

新柱子有经过前处理吗？

要不就是柱子问题了。
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12楼2011-02-21 14:38:23
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fisher850

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-02-21 06:38:23:
新柱子有经过前处理吗？

要不就是柱子问题了。

额,只听说过样品前处理,你说的应该是老化吧
我用流动相缓慢提速冲洗了几个小时,应该就可以了吧,再说,老化不好应该只是峰形不好,而不会出现不出峰的情况吧……
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13楼2011-02-21 15:59:37
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by fisher850 at 2011-02-21 07:59:37:
额,只听说过样品前处理,你说的应该是老化吧
我用流动相缓慢提速冲洗了几个小时,应该就可以了吧,再说,老化不好应该只是峰形不好,而不会出现不出峰的情况吧……

额，我指的就是老化。。。
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14楼2011-02-21 16:00:46
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fisher850

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-02-21 08:00:46:
额，我指的就是老化。。。

我想,我用流动相冲洗了几个小时,应该可以了吧.呵呵.
我现在要去换台液相试试看,如果还不行的话,我就要去找厂家换柱子了.
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15楼2011-02-21 16:07:20
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)
fisher850(金币+1): 谢谢你的祝福哦:) 2011-02-22 16:03:24
引用回帖:
Originally posted by fisher850 at 2011-02-21 08:07:20:
我想,我用流动相冲洗了几个小时,应该可以了吧.呵呵.
我现在要去换台液相试试看,如果还不行的话,我就要去找厂家换柱子了.

祝好运。
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16楼2011-02-21 16:24:07
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sq201

木虫 (小有名气)
fisher850(金币+1): 恩,学习了:)谢谢大侠! 2011-02-22 16:04:25
引用回帖:
Originally posted by fisher850 at 2011-02-21 00:25:33:
买之前厂家那边用PEG做过测试，说是好用的，给的条件就是我上面写的那些，在5~8min之间就出峰了，可是我都走了100min了，也没个反应……真是郁闷啊……渗透压是不是理论塔板数？是大于等于16000的，他们测试的时 ...

呵呵。。。渗透极限不是理论塔板数，是指凝胶可用来分离化合物（或组分）相对分子质量的最大值，超过此极限，高相对分子质量化合物（或组分）都从凝胶颗粒间的空隙体积处流出，而无分离效果。
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17楼2011-02-22 12:19:42
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fisher850

金虫 (小有名气)
问题解决了,是保护柱的问题，跟GPC柱子不匹配……汗……如此明显的一个问题，居然没有留意到……在此先谢谢各位大侠的帮忙了：）
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18楼2011-03-01 13:45:52
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