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由田120516

新虫 (初入文坛)


[交流] 【求助/交流】基因敲除试验

我最近在做基因敲除试验,看了很多的文献,有一个问题一直让我很困惑,希望大家帮我解惑,谢谢!
我的方法是首先扩增要敲除的基因的全序列,并将其连接在骨架质粒pUC18的多克隆位点中,然后要将抗生素抗性基因插入到该基因中间,使其失活,从而构建用于基因敲除的自杀质粒。我不明白的是该抗生素抗性基因需要自己的启动子吗,还是它可以利用质粒本身的启动子进行转录翻译?
我看过很多文献,在这一点上都未做详细说明。但经过分析(查看抗生素抗性基因的长度),好像不需要自己的启动子。
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2008116068

木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
抗生素有自己的启动子
14楼2011-12-03 17:31:57
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