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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因敲除试验
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由田120516

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】基因敲除试验

我最近在做基因敲除试验，看了很多的文献，有一个问题一直让我很困惑，希望大家帮我解惑，谢谢！
我的方法是首先扩增要敲除的基因的全序列，并将其连接在骨架质粒pUC18的多克隆位点中，然后要将抗生素抗性基因插入到该基因中间，使其失活，从而构建用于基因敲除的自杀质粒。我不明白的是该抗生素抗性基因需要自己的启动子吗，还是它可以利用质粒本身的启动子进行转录翻译？
我看过很多文献，在这一点上都未做详细说明。但经过分析（查看抗生素抗性基因的长度），好像不需要自己的启动子。
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1楼 2011-01-23 09:12:31
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cheney00

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你会发现抗性基因ORF前面还有一段序列。里边就有抗性基因自身的promoter
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18楼2013-10-06 11:44:07
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