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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】哪位虫友有pPICZaA 载体和SMD1168或GS115菌株
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嘉笛

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】哪位虫友有pPICZaA 载体和SMD1168或GS115菌株 已有3人参与

最近想构建甲醇酵母表达载体，想用pPICZaA上的his tag进行纯化，望有此载体和菌株的虫友不吝分享，非常感谢！
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1楼 2011-01-19 11:41:56
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PCR体系

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我也遇到这个问题，不知楼主解决没有？
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6楼2011-08-17 21:18:20
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austin2008

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 呵呵，很热心，鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-19 22:54:29
引用回帖:
Originally posted by 嘉笛 at 2011-01-19 11:41:56:
最近想构建甲醇酵母表达载体，想用pPICZaA上的his tag进行纯化，望有此载体和菌株的虫友不吝分享，非常感谢！

你要的质粒和菌株我有，但是不建议用用pPICZaA上的his tag进行纯化，会影响蛋白活性的，还是自己加His-tag比较好！
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优秀是一种习惯;生命是一种过程;放弃是一种智慧;缺点是一种恩惠!
2楼2011-01-19 18:55:37
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嘉笛

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by austin2008 at 2011-01-19 18:55:37:




你要的质粒和菌株我有，但是不建议用用pPICZaA上的his tag进行纯化，会影响蛋白活性的，还是自己加His-tag比较好！

你好，请问自己构建加上的和pPICZaA上自带的有什么区别呢？初学，不太懂啊，麻烦不吝指教
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3楼2011-01-20 16:39:51
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austin2008

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 嘉笛 at 2011-01-20 16:39:51:

你好，请问自己构建加上的和pPICZaA上自带的有什么区别呢？初学，不太懂啊，麻烦不吝指教

pPICZaA上自带的His-tag前的c-myc 肽段会影响蛋白折叠和活性的，自己在C段或N-端加上His-tag就可以避免加上c-myc 肽段
赞一下(1人) 回复此楼
优秀是一种习惯;生命是一种过程;放弃是一种智慧;缺点是一种恩惠!
4楼2011-01-21 13:13:43
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