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嘉笛

木虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】哪位虫友有pPICZaA 载体和SMD1168或GS115菌株 已有3人参与

最近想构建甲醇酵母表达载体,想用pPICZaA上的his tag进行纯化,望有此载体和菌株的虫友不吝分享,非常感谢!
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嘉笛

木虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by austin2008 at 2011-01-19 18:55:37:




你要的质粒和菌株我有,但是不建议用用pPICZaA上的his tag进行纯化,会影响蛋白活性的,还是自己加His-tag比较好!

你好,请问自己构建加上的和pPICZaA上自带的有什么区别呢?初学,不太懂啊,麻烦不吝指教
3楼2011-01-20 16:39:51
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austin2008

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 呵呵,很热心,鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-19 22:54:29
引用回帖:
Originally posted by 嘉笛 at 2011-01-19 11:41:56:
最近想构建甲醇酵母表达载体,想用pPICZaA上的his tag进行纯化,望有此载体和菌株的虫友不吝分享,非常感谢!

你要的质粒和菌株我有,但是不建议用用pPICZaA上的his tag进行纯化,会影响蛋白活性的,还是自己加His-tag比较好!
优秀是一种习惯;生命是一种过程;放弃是一种智慧;缺点是一种恩惠!
2楼2011-01-19 18:55:37
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austin2008

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 嘉笛 at 2011-01-20 16:39:51:

你好,请问自己构建加上的和pPICZaA上自带的有什么区别呢?初学,不太懂啊,麻烦不吝指教

pPICZaA上自带的His-tag前的c-myc 肽段会影响蛋白折叠和活性的,自己在C段或N-端加上His-tag就可以避免加上c-myc 肽段
优秀是一种习惯;生命是一种过程;放弃是一种智慧;缺点是一种恩惠!
4楼2011-01-21 13:13:43
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PCR体系

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我也遇到这个问题,不知楼主解决没有?
6楼2011-08-17 21:18:20
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