版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

调剂小程序

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (6543)
>考研 (1448)
>导师招生 (1310)
>文献求助 (489)
>虫友互识 (409)
>基金申请 (243)
>休闲灌水 (235)
>考博 (221)
>论文投稿 (163)
>硕博家园 (156)
>招聘信息布告栏 (113)
>博后之家 (94)
>教师之家 (70)
>绿色求助(高悬赏) (45)
>公派出国 (42)
>留学生活 (35)

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

虫虫欲动

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 861
帖子: 133
在线: 95.4小时
虫号: 257586

[交流] 【求助/交流】电转化

各位达人，我构建基因组表达文库时，想将连接产物电转到DH5a中，但加1ul连接产物时，转不出东西来，但加入3ul以上连接产物转化，就被打穿了，请做过相关研究的朋友指点迷津。

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

eppendorf mutiprator的电击杯在其他品牌的电转化仪上适用吗？已经有4人回复
关于毕赤酵母电转化已经有10人回复
电转化电击时间短，才2ms~什么原因？？？5555555555555 已经有11人回复
9k表达质粒电转化km71 已经有8人回复
求助电转化相关问题已经有11人回复
急求酿酒酵母的电转感受态制备方法和转化方法已经有13人回复
求助毕赤酵母电转化问题已经有6人回复
【求助/交流】电转酵母的问题已经有4人回复
【求助/交流】热激法和电转化法已经有10人回复
电转化注意事项已经有14人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-01-06 22:43:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 55 (初中生)
金币: 7107.8
帖子: 432
在线: 152.9小时
虫号: 1082982

★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-07 09:53:21
虫虫欲动(金币+1): 2011-01-07 10:11:02

需要做阳性对照，计算你感受态细胞的转化效率的，低于10e8效率就基本不能用来做文库了吧

赞一下(1人)

4楼2011-01-07 09:10:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 9 个回答

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 55 (初中生)
金币: 7107.8
帖子: 432
在线: 152.9小时
虫号: 1082982

★
最爱花诗雨(金币+1):鼓励一下 2011-01-07 09:10:18
虫虫欲动(金币+1): 2011-01-07 10:10:48

连接产物够多的话，过一次PCR纯化柱子，把buffer换成水

既然是做文库，对转化效率要求比较高，你1ul转不出来，3ul就能达到要求了吗?

赞一下(1人)

2楼2011-01-07 09:03:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

★
最爱花诗雨(金币+1):有道理~~ 2011-01-07 09:12:19
虫虫欲动(金币+1): 2011-01-07 10:10:56

感受态细胞是怎么制备的？
我感觉应该还是感受态里面的离子浓度太高。连接产物那么一点，应该不会带入那么多离子的。

赞一下(1人)

3楼2011-01-07 09:04:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 17 (小学生)
金币: 1626.1
帖子: 991
在线: 82小时
虫号: 287776

杯子被击穿是盐浓度过高导致的，如果你要加3ul连接产物，那么需要将连接产物沉淀后重新溶于dd水中

5楼2011-01-07 10:34:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 9 个回答

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

	[考研] 085700资源与环境308求调剂 +3	墨墨漠 2026-03-18	3/150	2026-03-18 22:35 by bingxueer79
	[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +8	SUICHILD 2026-03-12	8/400	2026-03-18 20:55 by winsuccess
	[考研] 311求调剂 +6	26研0 2026-03-15	6/300	2026-03-18 14:43 by haxia
	[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +8	Ncdx123456 2026-03-13	9/450	2026-03-18 14:40 by haxia
	[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +6	慕寒mio 2026-03-16	6/300	2026-03-18 14:26 by 007_lilei
	[考研] 材料专硕306英一数二 +10	z1z2z3879 2026-03-16	13/650	2026-03-18 14:20 by 007_lilei
	[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +4	ioodiiij 2026-03-17	4/200	2026-03-18 12:36 by Linda Hu
	[考研] 280求调剂 +6	咕噜晓晓 2026-03-18	7/350	2026-03-18 11:25 by 无际的草原
	[考研] 0703化学调剂 +3	妮妮ninicgb 2026-03-17	3/150	2026-03-18 10:29 by macy2011
	[考研] 293求调剂 +11	zjl的号 2026-03-16	16/800	2026-03-18 08:10 by zhukairuo
	[考博] 26博士申请 +3	1042136743 2026-03-17	3/150	2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
	[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3	y9999 2026-03-15	5/250	2026-03-16 19:58 by y9999
	[考研] 085600调剂 +5	漾漾123sun 2026-03-12	6/300	2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
	[考研] 求老师收留调剂 +4	jiang姜66 2026-03-14	5/250	2026-03-15 20:11 by Winj1e
	[考研] 297求调剂 +4	学海漂泊 2026-03-13	4/200	2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
	[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7	温乔乔乔乔 2026-03-12	14/700	2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
	[考研] 求调剂 +5	一定有学上- 2026-03-12	5/250	2026-03-13 18:31 by ms629
	[考研] 295求调剂 +3	小匕仔汁 2026-03-12	3/150	2026-03-13 15:17 by vgtyfty
	[考研] 求调剂 +3	程雨杭 2026-03-12	3/150	2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
	[考研] 土木第一志愿276求调剂，科研和技能十分丰富，求新兴方向的导师收留 +3	土木小天才 2026-03-12	3/150	2026-03-13 15:01 by JourneyLucky