24小时热门版块排行榜    

查看: 1953  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

虫虫欲动

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】电转化

各位达人,我构建基因组表达文库时,想将连接产物电转到DH5a中,但加1ul连接产物时,转不出东西来,但加入3ul以上连接产物转化,就被打穿了,请做过相关研究的朋友指点迷津。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)



dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-07 09:53:21
虫虫欲动(金币+1): 2011-01-07 10:11:02
需要做阳性对照,计算你感受态细胞的转化效率的,低于10e8效率就基本不能用来做文库了吧
4楼2011-01-07 09:10:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)



最爱花诗雨(金币+1):鼓励一下 2011-01-07 09:10:18
虫虫欲动(金币+1): 2011-01-07 10:10:48
连接产物够多的话,过一次PCR纯化柱子,把buffer换成水

既然是做文库,对转化效率要求比较高,你1ul转不出来,3ul就能达到要求了吗?
2楼2011-01-07 09:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

最爱花诗雨(金币+1):有道理~~ 2011-01-07 09:12:19
虫虫欲动(金币+1): 2011-01-07 10:10:56
感受态细胞是怎么制备的?
我感觉应该还是感受态里面的离子浓度太高。连接产物那么一点,应该不会带入那么多离子的。
3楼2011-01-07 09:04:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)


杯子被击穿是盐浓度过高导致的,如果你要加3ul连接产物,那么需要将连接产物沉淀后重新溶于dd水中
5楼2011-01-07 10:34:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金啊基金 +3 longfie172 2026-08-20 3/150 2026-08-21 00:04 by wuchongjun
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见