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木虫 (著名写手)

[交流] 【交流】HPLC交流交流,呵呵,有问题集中讨论嘛 已有36人参与

HPLC是大伙最常用的仪器了吧,一起讨论讨论吧,其实有时候习惯很重要,细节很重要
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49楼: Originally posted by sdxujilei at 2012-02-11 15:24:24:
我现在把检测器从紫外换成示差检测器了,发现在进行参比池冲洗时,柱压总是升高很多,把柱子反接冲洗后恢复,再重复操作时还是同样的现象。我使用的是HC-75柱子。请你给看看是什么原因,谢谢!

换个柱子看看,排除一下原因
50楼2012-02-11 15:44:08
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51楼: Originally posted by sdxujilei at 2012-02-11 16:48:02:
这个是去年买的新柱子,没怎么用过,我换检测器的时候才换的这个。

替换法是最简单而高效的方法,要不打个测试样,看看柱效如何?仪器都正常吧,分段检查一下,看看哪儿有压力
52楼2012-02-11 17:58:11
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53楼: Originally posted by 小糊涂神 at 2012-02-11 18:09:39:
请问:同一样品,我年前用液相测与年后测样品的差异在于:年后峰面积高了很多很多倍,是什么原因,是因为检测器因为长久没用UV灯的能量恢复了还是怎么着?想知道,谢谢

平衡久一点,还有对照品是不是也同时变大呢?长期没用灯,有多久?就过年2个礼拜么?那不至于,好好冲冲仪器吧,用50%的甲醇-水洗洗进样器,反复多冲洗几次

[ Last edited by 885511 on 2012-2-11 at 18:59 ]
54楼2012-02-11 18:58:01
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55楼: Originally posted by 小糊涂神 at 2012-02-11 19:23:03:
灯有三个礼拜没用了……还有就是想问你一下,若柱子脏了 除了柱压高和分离度差还有其他什么表征吗》?

打一个测试样,就是尿嘧啶看看就知道了
56楼2012-02-11 19:27:04
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61楼: Originally posted by 小糊涂神 at 2012-02-12 15:30:12:
在其他论坛中,看到过“只要柱子筛板的孔对称,就可以将柱子反着冲”请问这样说对不对?还有,现在的柱子的筛板是不是都是对称的?还是以对称的居多?我比较关心waters的 \(^o^)/~

柱子如果不行了就换新的,这个反过来虽然可以暂时用一下,但是还是不合算的
63楼2012-02-17 10:45:53
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62楼: Originally posted by beyongyoung at 2012-02-16 21:30:55:
前辈,有些HPLC检测器的单位是AU,有的是mV。有没有统一单位的呢,或者固定的转化公式呢?

没有,只能同一台仪器做的进行比较
还有我不是前辈,我学习HPLC不久,新人了
64楼2012-02-17 10:46:36
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65楼: Originally posted by beyongyoung at 2012-02-18 21:00:09:
呵呵,请问,同一条件下,先后进样两次对照品,保留时间相差很大,5%左右,其可能性最大的原因是什么?

你看看是不是单向阀漏了,还是进样小瓶没有盖好啊,或者是流动相没有平衡到位,平衡一个晚上再做吧,条件是什么?
66楼2012-02-18 21:16:13
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67楼: Originally posted by beyongyoung at 2012-02-19 16:46:38:
手动进样,不存在小瓶的问题。如果是单向阀出现问题,还会伴随什么样的特征呢?另外,色谱仪做了一次高压试验后(压力在允许范围内),同样的柱,同样的条件,其柱压减低了许多。什么原因呢?

单向阀出现问题,压力会波动的,怕会漏液的,还有如果柱压减低了许多,说明柱子已经崩塌了,换新柱子把,祝你实验顺利!
个人意见,仅供参考
68楼2012-02-20 09:02:15
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1604275楼: Originally posted by a83875785 at 2012-03-28 20:29:51:
最近用GILSON的液相,发现当用100%甲醇时,柱压正常大概800psi;用54%的甲醇时柱压正常大概1900psi;可是当用90%水或者100%的水时,压力先是升到2000psi,持续5min,然后下降至1300psi,然后再也不变了,压力也没 ...

把单向阀拿下来彻底超超,还有滤头
71楼2012-03-29 23:25:36
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1604420楼: Originally posted by 2010062014 at 2012-03-29 21:39:59:
我做的一个黄酮混合标样,进样量一样,其他条件都一样,做了不同流速的0.5mL/min和0.8mL/ 的得到的色谱图各组分的峰面积都不一样了,请问流速对各组分的峰面积会有影响吗???

明显不一样啊,你看看公式就知道了,流速慢了,那么峰就展宽了,这个对比没有意义
72楼2012-03-29 23:27:01
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