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7clover

金虫 (著名写手)

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★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
warlen(金币+1):谢谢参与 2011-01-10 11:48:24
流动相之前用5%甲醇冲,3-5倍体积置换原来的甲醇,流动相走完后要先用5%甲醇水冲洗1个小时才能走梯度冲。
另外如果样品脏,考虑用保护柱。冲保护柱时倒着冲,也就是接到柱子后边。
一片叶子代表祈求一片叶子代表希望一片叶子代表爱情四片叶子=四种幸福
31楼2011-01-10 11:46:10
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luxin6222

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1.什么柱子?这个很重要!
2.样品溶剂与流动相是否互溶?
你用的盐浓度肯定不至于伤害柱子,一般盐浓度上限是100mmol。与有机相替换时用含10%有机相过渡一下就没问题了。
32楼2011-01-10 21:06:39
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永恒国度

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
看了前面的讨论,这点盐浓度肯定没问题的,醋酸盐也不算强,我们实验室经常干到100mM都没问题,楼主的柱子清洗也没有问题,不过你有没有注意过你的盐的质量?特别是国产盐的话,有时杂质还挺多的 使用之前缓冲盐都要过下0.22um的滤膜
33楼2012-03-06 23:45:17
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liu2011

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1957081楼: Originally posted by 永恒国度 at 2012-03-06 23:45:17
看了前面的讨论,这点盐浓度肯定没问题的,醋酸盐也不算强,我们实验室经常干到100mM都没问题,楼主的柱子清洗也没有问题,不过你有没有注意过你的盐的质量?特别是国产盐的话,有时杂质还挺多的 使用之前缓冲盐都要 ...

会不会是管路堵了,我以前遇到过
34楼2012-06-19 15:41:17
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yp3181321

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
问题解决了吗?没解决的话,我想我有个办法,你可以试试看。
你说确定是柱子的压力高,我分析是你的盐在柱子里面析出了,你用5%的甲醇水没有冲出来的原因。
直接把你抽滤后的水加热,加热到大概50摄氏度左右去冲柱子,流速控制在0.3-0.5吧,冲半个小时,记住,水的温度一直保持在50度,不断地加热水进去就好了,还有柱温箱也设为50度,应该就冲下来了,冲下来之后你立刻用甲醇替换出来里面的水,希望对你有帮助吧
35楼2012-06-19 22:32:45
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hongrixiake

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主 原因找到了的话   记得发上来分享下哈
36楼2012-06-26 15:49:34
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tigeropen

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感觉是流动相的问题,请一定保证流动相干净
37楼2012-06-26 16:22:18
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fannis

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
27楼: Originally posted by jiachenzhong at 2011-01-09 09:01:03
肯定是盐浓度高引起的,我也碰到过这种情况,要用水大量清洗,洗上一星期以上

确定?我洗了几天感觉都没有什么用,压力还是很高
爱生活爱媳妇儿~
38楼2013-04-13 15:12:35
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fannis

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
32楼: Originally posted by luxin6222 at 2011-01-10 21:06:39
1.什么柱子?这个很重要!
2.样品溶剂与流动相是否互溶?
你用的盐浓度肯定不至于伤害柱子,一般盐浓度上限是100mmol。与有机相替换时用含10%有机相过渡一下就没问题了。

我平时跑液相的时候,用乙腈过度到水,然后过度到乙酸铵,我记得乙酸铵的盐浓度用的是0.1M的,这个是不是对柱子影响很大,柱子是C18亲水柱,一般实验室一年要换好几根柱子的。。。我因为刚来实验室还没有一年,到底是这个样品就是很费柱子还是我们操作不当呢
爱生活爱媳妇儿~
39楼2013-04-13 15:18:33
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耳朵

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有没有看一下柱子使用有没有需要特别注意的?
40楼2013-04-13 22:08:29
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