【求助】高效液相新柱子用流动相后柱压升高，已经第二根新柱子了 - 新药研发 - 质量控制

一片叶子代表祈求一片叶子代表希望一片叶子代表爱情四片叶子=四种幸福

31楼2011-01-10 11:46:10

luxin6222

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1.什么柱子？这个很重要！
2.样品溶剂与流动相是否互溶？
你用的盐浓度肯定不至于伤害柱子，一般盐浓度上限是100mmol。与有机相替换时用含10%有机相过渡一下就没问题了。

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32楼2011-01-10 21:06:39

永恒国度

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看了前面的讨论，这点盐浓度肯定没问题的，醋酸盐也不算强，我们实验室经常干到100mM都没问题，楼主的柱子清洗也没有问题，不过你有没有注意过你的盐的质量？特别是国产盐的话，有时杂质还挺多的使用之前缓冲盐都要过下0.22um的滤膜

33楼2012-03-06 23:45:17

liu2011

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引用回帖:

1957081楼: Originally posted by 永恒国度 at 2012-03-06 23:45:17
看了前面的讨论，这点盐浓度肯定没问题的，醋酸盐也不算强，我们实验室经常干到100mM都没问题，楼主的柱子清洗也没有问题，不过你有没有注意过你的盐的质量？特别是国产盐的话，有时杂质还挺多的使用之前缓冲盐都要 ...

会不会是管路堵了，我以前遇到过

34楼2012-06-19 15:41:17

yp3181321

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问题解决了吗？没解决的话，我想我有个办法，你可以试试看。
你说确定是柱子的压力高，我分析是你的盐在柱子里面析出了，你用5%的甲醇水没有冲出来的原因。
直接把你抽滤后的水加热，加热到大概50摄氏度左右去冲柱子，流速控制在0.3-0.5吧，冲半个小时，记住，水的温度一直保持在50度，不断地加热水进去就好了，还有柱温箱也设为50度，应该就冲下来了，冲下来之后你立刻用甲醇替换出来里面的水，希望对你有帮助吧

35楼2012-06-19 22:32:45

hongrixiake

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楼主原因找到了的话记得发上来分享下哈

36楼2012-06-26 15:49:34

tigeropen

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感觉是流动相的问题，请一定保证流动相干净

37楼2012-06-26 16:22:18

fannis

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27楼: Originally posted by jiachenzhong at 2011-01-09 09:01:03
肯定是盐浓度高引起的，我也碰到过这种情况，要用水大量清洗，洗上一星期以上

确定？我洗了几天感觉都没有什么用，压力还是很高

爱生活爱媳妇儿~

38楼2013-04-13 15:12:35

fannis

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引用回帖:

32楼: Originally posted by luxin6222 at 2011-01-10 21:06:39
1.什么柱子？这个很重要！
2.样品溶剂与流动相是否互溶？
你用的盐浓度肯定不至于伤害柱子，一般盐浓度上限是100mmol。与有机相替换时用含10%有机相过渡一下就没问题了。

我平时跑液相的时候，用乙腈过度到水，然后过度到乙酸铵，我记得乙酸铵的盐浓度用的是0.1M的，这个是不是对柱子影响很大，柱子是C18亲水柱，一般实验室一年要换好几根柱子的。。。我因为刚来实验室还没有一年，到底是这个样品就是很费柱子还是我们操作不当呢

爱生活爱媳妇儿~

39楼2013-04-13 15:18:33

耳朵

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有没有看一下柱子使用有没有需要特别注意的？

40楼2013-04-13 22:08:29