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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 【求助】高效液相新柱子用流动相后柱压升高，已经第二根新柱子了
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Astrid_vj

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】高效液相新柱子用流动相后柱压升高，已经第二根新柱子了 已有28人参与

求助：我现在用的流动相是0.025mol/L乙酸铵（用冰醋酸调PH到3.8）-甲醇（95:5），第一根新柱子就进了一个样，之后用5%甲醇1.0流速冲洗了大半天，柱压居高不下，还越冲越高，再用纯甲醇0.2流速冲了一晚上，也是柱压越冲越高，反过来0.2流速又冲了五个小时，再正过来起始柱压低了，但还是慢慢往上升，然后又升到老高。然后又换了根新柱子，进了三个样，用完用5%甲醇冲洗压力明显比使用前增高3-5MPa，也是很缓慢的上升，这次上升比第一根柱子慢的多，可还是上升趋势，换甲醇也一样，不知道怎么回事，求大家帮帮忙，找不到原因实验都不敢做了。
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1楼 2011-01-04 20:09:21
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永恒国度

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看了前面的讨论，这点盐浓度肯定没问题的，醋酸盐也不算强，我们实验室经常干到100mM都没问题，楼主的柱子清洗也没有问题，不过你有没有注意过你的盐的质量？特别是国产盐的话，有时杂质还挺多的 使用之前缓冲盐都要过下0.22um的滤膜
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33楼2012-03-06 23:45:17
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zhychen2008

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
木笑笑(金币+1):谢谢参与 2011-01-05 18:01:52
我的经验是做含盐的流动性，冲柱子时一定先用水含量较高的溶剂冲洗，如10%甲醇或乙腈
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Yesterday.Today,Tomorrow！
2楼2011-01-05 00:13:52
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leilongli

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
木笑笑(金币+1):谢谢参与 2011-01-05 18:02:11
试一试，进空白后是什么结果，如正常那就说明是样品的问题，流动相不适合此样品
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-01-05 09:03:46
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cpuyxj

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
木笑笑(金币+1):谢谢参与 2011-01-05 18:02:18
我感觉是盐浓度高造成的，很容易析出，柱子当然要废了，本实验室很少会超过15mmol/L
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再想哭，也要微笑着说一句：你大爷的。
4楼2011-01-05 12:48:31
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