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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】cDNA-AFLP试验
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cond

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】cDNA-AFLP试验已有3人参与

大家好:有谁做过cDNA-AFLP吗？我最近做的跑聚丙烯胶，条带总是模糊，不知道是什么原因？请大家帮帮忙
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1楼2010-12-27 20:32:38
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xubo7

木虫之王 (文坛精英)

小木虫
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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Originally posted by cond at 2010-12-27 20:32:38:
大家好:有谁做过cDNA-AFLP吗？我最近做的跑聚丙烯胶，条带总是模糊，不知道是什么原因？请大家帮帮忙

我做过这个实验，不过你接下来想做什么呢？这个做后还要验证的。要不人家会说XXX假阳性
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人的品德很重要！！！不能失去德行！！！
3楼2011-01-05 10:57:11
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cyz20050505

木虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-29 20:28:28
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Originally posted by cond at 2010-12-27 20:32:38:
大家好:有谁做过cDNA-AFLP吗？我最近做的跑聚丙烯胶，条带总是模糊，不知道是什么原因？请大家帮帮忙

为什么要用cDNA来做AFLP？？？？？？目前第一次听说，都做到cDNA了，为什么并不做基因克隆，多态性，表达谱什么的，少说也能发个2的文章吧。
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2楼2010-12-29 18:22:49
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xubo7

木虫之王 (文坛精英)

小木虫
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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Originally posted by cond at 2010-12-27 20:32:38:
大家好:有谁做过cDNA-AFLP吗？我最近做的跑聚丙烯胶，条带总是模糊，不知道是什么原因？请大家帮帮忙

模糊原因应该是多种的，一是你的PCR产物，这个你可以先跑普通的琼脂糖胶，看看锐利度，没问题的话再接着做。接着做的话如果还是模糊，那就是胶浓度、电压、缓冲液的问题，这些问题逐一解决。相信没几次你的问题就会解决了。跑胶过程冲，温度高也是个大问题，怎么解决呢？一般就是吹空调，或者到温度低的地方去做。听说国外有差不度4°的地方，在这样的温度下实验，效果一定非常理想
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人的品德很重要！！！不能失去德行！！！
4楼2011-01-05 11:02:00
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cond

银虫 (正式写手)
[quote]Originally posted by xubo7 at 2011-01-05 10:57:11:

我做过这个实验，不过你接下来想做什么呢？这个做后还要验证的。要不人家会说XXX假阳性 [/quo
我想跑多态性，找出差异条带回收，测序。转录cDNA的时间一定要以mRNA为模板呢？我用总RNA为模板，是不是不好
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5楼2011-01-16 20:16:29
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