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cond

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】cDNA-AFLP试验 已有3人参与

大家好:有谁做过cDNA-AFLP吗?我最近做的跑聚丙烯胶,条带总是模糊,不知道是什么原因?请大家帮帮忙
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cyz20050505

木虫 (正式写手)


rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-29 20:28:28
引用回帖:
Originally posted by cond at 2010-12-27 20:32:38:
大家好:有谁做过cDNA-AFLP吗?我最近做的跑聚丙烯胶,条带总是模糊,不知道是什么原因?请大家帮帮忙

为什么要用cDNA来做AFLP??????目前第一次听说,都做到cDNA了,为什么并不做基因克隆,多态性,表达谱什么的,少说也能发个2的文章吧。
2楼2010-12-29 18:22:49
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xubo7

木虫之王 (文坛精英)

小木虫


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
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Originally posted by cond at 2010-12-27 20:32:38:
大家好:有谁做过cDNA-AFLP吗?我最近做的跑聚丙烯胶,条带总是模糊,不知道是什么原因?请大家帮帮忙

我做过这个实验,不过你接下来想做什么呢?这个做后还要验证的。要不人家会说XXX假阳性
人的品德很重要!!!不能失去德行!!!
3楼2011-01-05 10:57:11
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xubo7

木虫之王 (文坛精英)

小木虫


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by cond at 2010-12-27 20:32:38:
大家好:有谁做过cDNA-AFLP吗?我最近做的跑聚丙烯胶,条带总是模糊,不知道是什么原因?请大家帮帮忙

模糊原因应该是多种的,一是你的PCR产物,这个你可以先跑普通的琼脂糖胶,看看锐利度,没问题的话再接着做。接着做的话如果还是模糊,那就是胶浓度、电压、缓冲液的问题,这些问题逐一解决。相信没几次你的问题就会解决了。跑胶过程冲,温度高也是个大问题,怎么解决呢?一般就是吹空调,或者到温度低的地方去做。听说国外有差不度4°的地方,在这样的温度下实验,效果一定非常理想
人的品德很重要!!!不能失去德行!!!
4楼2011-01-05 11:02:00
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cond

银虫 (正式写手)

[quote]Originally posted by xubo7 at 2011-01-05 10:57:11:

我做过这个实验,不过你接下来想做什么呢?这个做后还要验证的。要不人家会说XXX假阳性 [/quo
我想跑多态性,找出差异条带回收,测序。转录cDNA的时间一定要以mRNA为模板呢?我用总RNA为模板,是不是不好
5楼2011-01-16 20:16:29
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