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【求助】血小板粘附试验----梯度脱水
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wccht110
铜虫
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[交流]
【求助】血小板粘附试验----梯度脱水
参照文献步骤做血小板粘附试验。做到梯度脱水的时候出了问题,请大家帮忙。
在配置50%,60%,70%,80%,90%,100酒精(V酒精/V纯水)后,将膜放入其中,各5分钟。50-70%。膜还正常,到80%后薄膜开始溶解掉了,最后做到100%时候,膜大小大概缩掉了1/3,并且形貌变化也很大。
膜是自己合成的直链PU膜,重均分子量为4W左右,厚度大概是1mm.我原来以为是PU膜分子量小了。那我也看到文献分子量也是4W多,也能做。
请教:这是怎么回事,我该怎么办?
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2010-12-23 10:19:13
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铜虫
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膜在酒精里面溶解。我在想生物试验中主要酒精,丙酮用来脱水,他们的沸点都低,那能不能够用二卤甲烷了,它的沸点也很低。或者,不脱水,对于SEM下有很大影响吗?或者在酒精脱到70%的时候,后面不脱了?
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5楼
2010-12-26 15:29:53
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论! 2010-12-24 17:31:49
wccht110(金币+1): 2010-12-26 15:32:08
对于乙醇脱水变形,可以改用冷冻干燥
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2010-12-24 15:06:44
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论! 2010-12-24 17:32:03
americanyk:编辑内容 2010-12-24 10:53
americanyk(金币+1):tks 2010-12-24 17:53:31
wccht110(金币+1): 2010-12-26 15:23:54
wccht110(金币+1): 2010-12-26 15:24:02
脱得太快了,建议从30%开始,延长时间至10-20min,放在4度冰箱中做,
如果你的膜本来就溶于酒精可能就不能这么脱水了。你可以在不做血小板粘附的情况下将样品放于100%酒精中泡半小时,如果膜会溶,应该就没法做了,
楼上的冷冻干燥我不太明白,冷冻干燥应该指的是脱完水以后类似临界点干燥.
[
Last edited by americanyk on 2010-12-24 at 10:53
]
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2010-12-24 15:19:09
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我去试试酒精-20度下试试,看看溶不溶解。
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6楼
2010-12-26 15:31:48
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