应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】粪便DNA提取的问题
51/1返回列表
查看: 1422  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】粪便DNA提取的问题

本人要提取不同人粪便中的细菌总DNA，后面要用于定量，称取的是100mg冷冻的粪便，然后按照试剂盒步骤提取的，步骤中有一步是吸取250mL上清，做下一步的提取，因为我要做定量，是不是所有的上清我都要取，然后提取里面的DNA呀，因为做到这一步时，不是所有的样品的上清都一样多的，然后后面的步骤中所添加的提取试剂是不是要按比例增加呢？？望有经验的人指点，谢谢了！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-14 12:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigboy123

铜虫 (小有名气)
dingjunrong(金币+2): 2010-12-15 08:39:50
呵呵，只要不是差数量级就可以了。PCR的定量也不是准确定量，准确率的波动范围也在10倍左右，同一DNA样本重复做也会有这个波动的。所以你取50ul和250ul所测量的结果其Ct值应该差距不大。
如果你要特别准确，可以固定粪便质量，然后把所有上清都裂解处理，然后分几次加到柱子里。
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-14 20:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

bigboy123

铜虫 (小有名气)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-14 14:33:55
dingjunrong(金币+1): 2010-12-14 17:06:57
控制一下你悬浮液的体积就可以了，
一般按照说明书要求加250ul 上清基本就够用了，剩下的可以备用。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-14 13:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by bigboy123 at 2010-12-14 13:15:59:
控制一下你悬浮液的体积就可以了，
一般按照说明书要求加250ul 上清基本就够用了，剩下的可以备用。

可是我后面要通过PCR手段对不同粪便样品中的菌定量的，如果全部都取250ul的话，跟原来称取的粪便的重量就无法联系起来了，而且不同的样品经过多步处理离心后的上清液的体积是不同的，为了定量，是不是要取全部的比较好呀？？谢谢！
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-14 16:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingshi2

银虫 (小有名气)
有专门的粪便DNA提取试剂盒
赞一下 回复此楼
5楼2011-01-05 20:40:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +9 大米饭！ 2026-03-15 12/600 2026-03-16 21:59 by 大米饭！
[考研] 材料专硕306英一数二 +4 z1z2z3879 2026-03-16 6/300 2026-03-16 19:38 by z1z2z3879
[考研] 326求调剂 +4 诺贝尔化学奖觊� 2026-03-15 7/350 2026-03-16 17:11 by 诺贝尔化学奖觊�
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +7 曦熙兮 2026-03-15 7/350 2026-03-16 16:34 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 材料与化工求调剂 +3 为学666 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:09 by 加号+
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 290求调剂 +4 @将就将就看 2026-03-10 8/400 2026-03-14 14:23 by 千千运气
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:12 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 求调剂（材料与化工327） +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭