应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】粪便DNA提取的问题
51/1返回列表
查看: 1423  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】粪便DNA提取的问题

本人要提取不同人粪便中的细菌总DNA，后面要用于定量，称取的是100mg冷冻的粪便，然后按照试剂盒步骤提取的，步骤中有一步是吸取250mL上清，做下一步的提取，因为我要做定量，是不是所有的上清我都要取，然后提取里面的DNA呀，因为做到这一步时，不是所有的样品的上清都一样多的，然后后面的步骤中所添加的提取试剂是不是要按比例增加呢？？望有经验的人指点，谢谢了！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-14 12:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by bigboy123 at 2010-12-14 13:15:59:
控制一下你悬浮液的体积就可以了，
一般按照说明书要求加250ul 上清基本就够用了，剩下的可以备用。

可是我后面要通过PCR手段对不同粪便样品中的菌定量的，如果全部都取250ul的话，跟原来称取的粪便的重量就无法联系起来了，而且不同的样品经过多步处理离心后的上清液的体积是不同的，为了定量，是不是要取全部的比较好呀？？谢谢！
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-14 16:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

bigboy123

铜虫 (小有名气)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-14 14:33:55
dingjunrong(金币+1): 2010-12-14 17:06:57
控制一下你悬浮液的体积就可以了，
一般按照说明书要求加250ul 上清基本就够用了，剩下的可以备用。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-14 13:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bigboy123

铜虫 (小有名气)
dingjunrong(金币+2): 2010-12-15 08:39:50
呵呵，只要不是差数量级就可以了。PCR的定量也不是准确定量，准确率的波动范围也在10倍左右，同一DNA样本重复做也会有这个波动的。所以你取50ul和250ul所测量的结果其Ct值应该差距不大。
如果你要特别准确，可以固定粪便质量，然后把所有上清都裂解处理，然后分几次加到柱子里。
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-14 20:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingshi2

银虫 (小有名气)
有专门的粪便DNA提取试剂盒
赞一下 回复此楼
5楼2011-01-05 20:40:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 4/200 2026-03-16 23:52 by zbzihdhd
[考研] 材料专硕306英一数二 +4 z1z2z3879 2026-03-16 6/300 2026-03-16 19:38 by z1z2z3879
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:35 by 沐霖12138
[考研] 304求调剂 +6 小熊joy 2026-03-14 6/300 2026-03-16 12:59 by Iveryant
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 抓着星星的女孩 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:47 by userper
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 085602化工求调剂 +7 董boxing 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:07 by BruceLiu320
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭