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[交流]
【求助/交流】【求助】细菌未知功能基因的克隆方法
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各位达人，请教问题如下： 化合物A在WT菌株中的代谢途径是A->B->C. 在化学诱变株Mut中B->C的相关gene被阻断，有可能是调节gene，也有可能是功能gene。 其中化合物ABC已知，但只有A能买得到。 A->B的gene已知，B->C的功能gene未知。 WT菌株基因组未测序~（貌似花钱比较多） 请问有什么好的方法，克隆B-C的功能gene呢？ 方法原理是什么？实验难度如何？可行性有多高？经费需求多少？ 小弟金币不多，倾情奉献~  |
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4楼2010-12-13 20:53:28
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scelab(金币+3):谢谢交流 2010-12-14 21:25:16
scelab(金币+3):谢谢交流 2010-12-14 21:25:16
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1. Subtractive hybridization is a method to detect the differentially expressed gene(s) rather than the genomic DNA sequence insertion or deletion. I haven't carried out this technique, so I do not have much experience on it. 2. As to Microarray, if you don't have the microarray of the very species, I think you can try using those of the nearest relative species. Of cause, in this case, I think it is hard to do Microarray. 个人观点，欢迎拍砖，呵呵！  [ Last edited by 香菱儿 on 2010-12-14 at 12:54 ] |
14楼2010-12-14 12:45:21