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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分离培养后如何判断是纯菌？
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ycj0746

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】分离培养后如何判断是纯菌？已有13人参与

分离培养后如何判断是纯菌？直接将菌液送检测序通常测序出来含有杂合体或者说是菌液不纯，反复划线挑单菌后镜检形态均一致，但就是测序测不出来。如何判断纯或不纯啊？有没准确点的指标，而不是说眼睛看就行。
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1楼2010-12-11 17:36:46
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ycj0746

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xuanxuankaoyan at 2010-12-19 19:41:07:

可以适当的稀释菌液，ＰＣＲ，测序。

我的理解应该是不稀释，直接取菌液原样PCR，然后测序，得到序列结果才能算纯。这里PCR扩增的应该是16S的全长吧，而不失其中部分片段的序列结果。PCR然后测序才能得到纯或不纯的结果，如果不纯，那么还得反复纯化再次PCR，然后再送检，挺耗费时间的。
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15楼2010-12-19 19:51:49
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xuanxuankaoyan

至尊木虫 (知名作家)
直接菌液PCR看条带
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2楼2010-12-11 18:31:09
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yangjun130

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-12 13:59:21
可以用稀释涂布的方法，多涂布几次，然后挑选你要的菌落划线在富集培养，若仍不存，可重复多次，直至纯化
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3楼2010-12-12 08:57:46
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girlfisher

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
测序测不出是说有杂信号还是没信号还是其他原因?
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4楼2010-12-12 10:42:58
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